基因工程制药

**章基因工程制药概论1 **节基因工程制药的发展历史1 一、传统的生物制药技术是现代生物制药的基础1 二、基因工程制药是现代生物技术制药发展的核心2 三、基因工程制药的现状及前景3 第二节基因工程药品的研发过程4 一、基因工程药品的实验室研究阶段5 二、基因工程药品的开发阶段5 三、基因工程药品的临床实验6 参考文献7 第二章基因工程制药9 **节制药基因的克隆9 一、制药基因的获得9 二、制药基因与载体分子的体外连接反应15 三、将人工重组DNA分子导入到能够正常复制的宿主细胞中23 四、重组子的鉴定和筛选24 第二节重组蛋白表达系统25 一、原核表达系统25 二、酵母表达系统28 三、昆虫细胞表达系统31 四、哺乳动物细胞表达系统33 五、转基因植物表达系统37 六、转基因动物表达系统40 七、表达系统的选择43 第三节蛋白的分离纯化43 一、蛋白样品的前期处理44 二、蛋白分离纯化主要方法44 三、包涵体的分离纯化53 四、抗体的分离纯化56 第四节转染技术58 一、转染方法58 二、优化转染条件63 三、报告基因63 第五节融合标签65 一、融合标签的特征及分类65 二、融合标签各论65 第六节已投入市场的基因工程药物70 一、治疗用激素70 二、干扰素77 三、造血因子和凝血因子81 四、白细胞介素85 五、*新投入市场的药物86 参考文献87 第三章抗体工程制药88 **节抗体88 一、抗原、抗体的概念及抗原抗体的关系 88 二、抗体的分子结构、功能及其酶解片段88 三、免疫球蛋白基因的结构和抗体多样性96 第二节单克隆抗体100 一、单克隆抗体产生的基本原理100 二、单克隆抗体的应用101 第三节基因工程抗体102 一、基因工程抗体的特点102 二、基因工程抗体的应用102 第四节抗体的氨基酸顺序105 第五节抗体分子的克隆108 一、抗体基因克隆的方法108 二、抗体基因克隆中的重要技术环节110 三、嵌合抗体113 四、改形抗体115 五、表面氨基酸残基的“人源化”——镶面抗体119 六、表位印迹选择119 七、单链抗体120 八、双特异性及多特异性抗体123 九、小分子抗体127 第六节筛选抗体克隆的展示技术129 一、噬菌体展示技术129 二、酵母表面展示系统132 三、核糖体展示技术134 四、细菌表面展示技术136 五、噬斑印迹 138 六、质粒展示技术138 第七节抗体亲和力的优化140 一、鼠源及其嵌合抗体的人源化140 二、通过改进亲和力来增加抗体的功效140 三、通过选择性的改进结合速率常数增加抗体功效141 四、构建广谱抗体141 第八节抗体药物142 一、概述142 二、FDA已批准的部分抗体(按时间顺序排列)143 参考文献150 第四章基因工程药物设计与研制方法151 **节重组蛋白药物的复制151 一、复制生物技术药品的一般技术流程152 二、复制重组蛋白药品存在的问题152 第二节通过对现有药物的优化和改造研发新药154 一、定向突变155 二、定点突变160 三、糖基化工程与新药研究166 第三节创新药物设计167 一、通过筛选同源基因的方法发现新的药物基因或药物靶基因168 二、通过RNA的表达谱筛选新的药物基因和靶基因168 三、蛋白组学168 四、使用寡核苷酸技术证实药物分子169 五、基因功能的系统分析169 六、使用生物模型发现新药170 七、新药开发的展望171 参考文献171 第五章基因工程疫苗173 **节疫苗的概述173 一、疫苗发展简史173 二、疫苗的种类174 三、疫苗基本成分和性质174 四、疫苗免疫途径175 第二节传统疫苗及其研发原则176 一、灭活疫苗176 二、弱毒疫苗178 第三节基因工程疫苗及其研发原则180 一、合成多肽疫苗及其研发原则180 二、亚单位疫苗及其研发原则181 三、基因缺失疫苗及其研发原则 182 四、重组活载体疫苗及其研发原则183 五、核酸疫苗及其研发原则187 第四节其他疫苗190 一、T细胞疫苗190 二、树突状细胞疫苗191 三、肿瘤疫苗194 四、避孕疫苗195 第五节免疫佐剂196 一、免疫佐剂的定义和特点196 二、佐剂的种类197 参考文献201