基因工程制药技术实训教程

**章 基因工程制药实训概论 一、实验室守则 二、实验器材的清洗、包装与灭菌 三、实验操作流程 四、实验报告 第二章 基因的克隆 实验1 动物组织总RNA的提取 实验2 细菌质粒DNA的提取 实验3 琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段 实验4 DNA片段的回收与纯化 实验5 聚合酶链式反应扩增目的基因 实验6 限制性内切酶酶切分析 实验7 目的基因片段与载体连接 实验8 大肠杆菌感受态细胞的制备及重组质粒的转化 实验9 重组子筛选及鉴定 第三章 重组蛋白的表达与纯化 实验10 IPTG诱导重组蛋白表达 实验11 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测重组蛋白 实验12 重组蛋白的纯化方法（盐析法） 实验13 重组蛋白的纯化方法（疏水层析法） 实验14 重组蛋白的纯化方法（离子交换层析法） 实验15 重组蛋白的纯化方法（亲和层析法） 实验16 Westernblotting鉴定重组蛋白 第四章 重组蛋白的生物活性评估 实验17 动物细胞原代培养 实验18 细胞传代培养 实验19 细胞冻存与复苏 实验20 细胞计数与活力测定 第五章 抗体药物的制备 实验21 多克隆抗体的制备 实验22 单克隆抗体制备过程中小鼠脾细胞悬液的制备 实验23 单克隆抗体制备过程中小鼠巨噬细胞的分离 实验24 单克隆抗体制备过程中的细胞融合与培养 实验25 单克隆抗体的制备过程（体内诱生法） 实验26 间接ELISA法测定抗体效价 第六章 设计性实验 一、设计性实验的选题、设计与实施 二、参考范例 附录1 常用试剂和培养基的配制 附录2 常用实验仪器的使用与保养 附录3 基因工程安全管理办法