乳酸菌诱导结肠癌细胞凋亡机制研究

**章结肠癌及乳酸菌功能关系概述
**节引言
一、结肠癌简介
二、结肠癌发病症状
三、乳酸菌抑制结肠癌的可能途径
第二节人结肠癌的发病原因
一、结肠癌发病原因简述
二、环境化学物质诱发的结肠癌
三、饮食因素诱发的结肠癌
四、细菌酶诱发的结肠癌
第三节乳酸菌调控机体免疫功能
一、乳酸菌对非特异性免疫功能的影响
二、乳酸菌对特异性免疫功能的影响
三、乳酸菌激活机体的抗肿瘤免疫
第二章乳酸菌抗结肠癌功能研究进展
**节乳酸菌抗结肠癌作用的机理
一、乳酸菌降低食源性致癌物质的毒性
二、乳酸菌抑制癌细胞生长及诱导癌细胞凋亡
三、乳酸菌对潜在致癌物质致癌作用的阻断
四、乳酸菌对饮食诱发结肠癌作用的阻断
第二节乳酸菌不同菌体成分抗结肠癌作用机理
一、乳酸菌的菌体细胞抗结肠癌作用研究
二、乳酸菌的菌体细胞壁抗结肠癌作用研究
三、乳酸菌的菌体细胞质抗结肠癌作用研究
四、乳酸菌的菌体代谢产物抗结肠癌作用研究
第三节乳酸菌与线粒体凋亡信号途径
一、活性氧族
二、线粒体凋亡途径
第四节国内开展的课题相关研究
第三章乳酸菌抗肿瘤研究技术方法
**节乳酸菌抗肿瘤研究设施、材料
一、实验仪器与设备
二、实验所用试剂与药品
三、实验所用菌株与细胞
四、实验用培养液
第二节乳酸菌抗肿瘤研究检测方法
一、对结肠癌细胞增殖抑制能力的测定
二、乳酸菌对人肠道上皮细胞黏附性能的测定
三、乳酸菌对酸耐受能力的测定
四、乳酸菌对胆盐耐受能力的测定
五、乳酸菌16S rDNA 的鉴定
六、蛋白浓度的测定
七、乳酸菌肽聚糖分子量的检测
八、乳酸菌肽聚糖氨基酸组成分析
九、乳酸菌菌体和肽聚糖的形态学观察
十、HT-29细胞毒性的测定
十一、HT-29细胞形态学观察
十二、HT-29细胞DNA损伤的测定
十三、HT-29细胞凋亡与坏死的测定
十四、HT-29细胞周期的测定
十五、HT-29细胞线粒体膜电位的测定
十六、HT-29细胞ROS的检测
十七、HT-29细胞线粒体和胞浆中细胞色素C的检测
十八、HT-29细胞总RNA的提取
十九、体外反转录合成及RT-PCR反应
二十、HT-29细胞总蛋白提取与蛋白含量的测定
二十一、HT-29细胞总蛋白的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳
二十二、Western blot分析
第四章乳酸菌抗肿瘤核心技术研究
一、抗结肠癌功能乳酸菌菌株的体外筛选
二、抗结肠癌功能乳酸菌菌体成分的筛选
三、乳酸菌肽聚糖对HT-29细胞的抑制作用
四、乳酸菌肽聚糖诱导HT-29细胞凋亡途径的研究
五、乳酸菌肽聚糖诱导HT-29细胞凋亡线粒体途径研究
六、数据处理及统计分析
第五章抗结肠癌功能乳酸菌的筛选
**节引言
第二节基于抑制HT-29细胞增殖能力筛选抗结肠癌乳酸菌
第三节基于乳酸菌的益生功能筛选抗结肠癌功能乳酸菌
一、乳酸菌黏附于肠上皮细胞的能力
二、乳酸菌对模拟胃液的耐受能力
三、乳酸菌对模拟小肠液的耐受能力
第四节乳酸菌菌种鉴定
第五节本章小结
第六章抗结肠癌功能乳酸菌菌体成分的筛选
**节引言
第二节乳酸菌细胞壁和细胞质的提取及蛋白含量测定
一、考马斯亮蓝G-250标准曲线
二、乳酸菌细胞壁和细胞质蛋白质浓度计算
第三节基于抑制HT-29细胞增殖能力筛选乳酸菌菌体成分一、乳酸菌细胞壁和细胞质对HT-29细胞增殖的抑制
二、乳酸菌细胞壁和细胞质对HT-29细胞的毒性作用
第四节基于诱导HT-29细胞DNA损伤筛选乳酸菌菌体成分
一、单细胞凝胶电泳实验
二、琼脂糖凝胶电泳实验
第五节基于诱导HT-29细胞凋亡筛选乳酸菌菌体成分
一、乳酸菌细胞壁和细胞质诱导HT-29细胞的凋亡
二、乳酸菌细胞壁和细胞质对HT-29细胞膜电位的影响
三、乳酸菌细胞壁和细胞质对HT-29细胞周期的影响
四、乳酸菌细胞壁和细胞质对HT-29细胞形态学的影响
第六节乳酸菌细胞壁对正常细胞毒性影响
第七节本章小结
第七章乳酸菌肽聚糖对HT-29细胞抑制作用
**节引言
第二节乳酸菌肽聚糖对HT-29细胞增殖的抑制
一、5-氟尿嘧啶对HT-29的毒性作用
二、MTT实验
三、台盼蓝染色实验
第三节乳酸菌肽聚糖理化性质分析
一、乳酸菌肽聚糖蛋白含量的测定
二、乳酸菌肽聚糖分子量的测定
三、乳酸菌肽聚糖氨基酸组成及含量
四、扫描电镜观察乳酸菌肽聚糖形态
五、透射电镜观察乳酸菌肽聚糖形态
第四节乳酸菌肽聚糖诱导HT-29细胞凋亡
一、HE染色
二、Hoechst荧光染色
三、透射电镜观察乳酸菌肽聚糖诱导HT-29细胞线粒体的损伤
四、乳酸菌肽聚糖对HT-29细胞周期的影响
五、乳酸菌肽聚糖诱导HT-29细胞凋亡
第五节乳酸菌肽聚糖对正常细胞毒性影响
第六节本章小结
第八章肽聚糖诱导HT-29细胞凋亡途径研究
**节引言
第二节乳酸菌肽聚糖对HT-29细胞凋亡相关基因的影响
一、HT-29细胞总RNA的提取
二、乳酸菌肽聚糖对HT-29细胞凋亡相关基因的影响
三、乳酸菌肽聚糖对HT-29细胞Cyto-C基因表达的影响
第三节乳酸菌肽聚糖诱导HT-29细胞凋亡机制研究
一、乳酸菌肽聚糖诱导HT-29细胞线粒体膜电位的损失
二、乳酸菌肽聚糖诱导HT-29细胞ROS的堆积
三、乳酸菌肽聚糖诱导HT-29细胞线粒体Cyto-C的释放
四、乳酸菌肽聚糖诱导HT-29细胞凋亡相关蛋白的变化
第四节本章小结
总结
展望
参考文献