基因工程操作基础

项目1 大肠杆菌的培养与分离
任务1 培养基的制备
任务2 大肠杆菌的接种
任务3 大肠杆菌的培养

项目2 核酸的分离与纯化
子项目1 大肠杆菌质粒DNA的提取及定性、定量检测
任务1 试剂的配制
任务2 质粒的抽提
任务3 质粒的定性检测
任务4 质粒的定量和纯度检测
子项目2 植物基因组DNA和总RNA的提取
任务1 试剂的配制
任务2 植物基因组DNA的提取
任务3 植物总RNA的提取
任务4 DNA（RNA）的定性、定量检测
子项目3 动物基因组DNA和总RNA的提取
子项目3—1 动物基因组DNA的提取
任务1 标本的采集与保存
任务2 试剂的配制
任务3 DNA的提取
任务4 DNA的纯度和浓度检测
子项目3—2 动物总RNA的提取
任务1 标本的采集与保存
任务2 试剂的配制
任务3 总RNA的提取
任务4 RNA的纯度和浓度检测
子项目4 酿酒酵母DNA及总RNA的提取
任务1 试剂的配制
任务2 酵母菌染色体DNA的提取（珠磨法）
任务3 酵母菌总RNA的提取（热酚法）
任务4 DNA（RNA）的浓度和纯度检测

项目3 利用聚合酶链式反应（PCR）获取基因
子项目1 目的基因的体外扩增
任务1 引物的设计和合成
任务2 PCR扩增目的基因
任务3 琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物
任务4 目的PCR产物的回收
子项目2 引物拼接PCR技术合成目的基因
任务1 目的基因的合成
任务2 PCR产物的检测和回收

项目4 目的基因的克隆、转化与表达
任务1 目的基因MluI与克隆载体pUC19的连接
任务2 TOPlO感受态的制备
任务3 连接产物pucl9-Mlu I的转化和筛选（化学转化法）
任务4 重组质粒puCl9-Mlu I和表达栽体pET30a的酶切
任务5 酶切后载体pET30a和目的基因Mlu I的连接
任务6 连接产物pET30a-Mlu I的转化
任务7 转化菌株的培养和筛选
任务8 目的基因的蛋白表达

项目5 DNA序列的定点突变
任务1 突变基因的合成
任务2 重组质粒的构建
任务3 重组质粒的转化和检测

项目6 cDNA文库的构建
附录 主要实验仪器的使用