生物化学实验教程

**篇 实验要求 **章 生物化学实验基本要求 **节 生化实验室学生实验守则 （1）学生在实验课前要认真预习实验内容，明确实验目的和要求，了解实验的步骤、方法和基本原理，写好预习报告。 （2）学生进入实验室时，需穿实验服，不得穿拖鞋和暴露的衣服。 （3）自觉遵守实验室纪律，保持室内安静，禁止喧哗。 （4）爱护仪器设备，严格遵守仪器操作规程。仪器发生故障时应及时报告教师，未经许可不得随意拆卸、检修。因违反操作规程造成仪器损坏者需按规定赔偿。 （5）配制试剂要节约，按实验实际使用量配制。多余的贵重试剂、材料和各种有机试剂要按照教师要求回收和处理，不得随意丢弃。 （6）所用试剂和样品，必须贴上标签，标签写上试剂名称、浓度、班级、姓名和日期。易挥发溶液和酸性溶液必须严密封口。 （7）各实验组的仪器和玻璃器皿需妥善保管，实验完毕及时清理洗净，放回各组的实验柜内。不得将实验器皿丢弃在实验台面上或水池内，保持实验台面整洁。 （8）实验室内的一切物品，未经实验室负责人批准，不得私自带出实验室。 （9）实验完毕后，值日生负责做好实验室的卫生清理工作，并检查水、电，关好门、窗，经教师检查合格后，方可离开实验室。 （张瑞英） 第二节 实验室安全及防护知识 生物化学实验室是进行教学和科研的场所，人员多、设备多、线路多、化学试剂多，稍有不慎，水、电、火、毒、伤等事故均有可能发生，会危及人体健康乃至生命。学生初次进入实验室，教师及实验室管理人员应首先对学生进行实验室安全观念的教育，要求学生重视实验中的安全工作，防患于未然。学生应该熟悉实验室安全防护知识。一旦发生事故，应及时采取适当的急救措施。 一、实验室安全知识 （一）安全用电 （1）实验室管理人员必须经常检查电源线路及插座，发现电线绝缘胶皮老化或插座破裂等隐患要及时维修更换。 （2）不得超负荷使用电器设备。 （3）严格按照仪器使用规程操作。 （4）使用仪器设备时，要注意电压、电流是否符合仪器的规定要求，必要时应使用稳压器或调压器。 （二）节约用水，安全防火 （1）节约用水。用水完毕应随手关闭水龙头。水槽内不可堆积仪器或杂物，以防排水不畅时溢出水槽。 （2）生物化学实验过程中经常使用一些可燃易爆试剂，如乙醚、丙酮、乙醇、苯等，因此，实验室内严禁吸烟，冰箱内不许存放可燃液体。实验室内使用的可燃物，应远离火源和电器开关。 （3）可燃易爆炸物质的残渣不得倒入污物桶或水槽中，应收集在指定的容器内。 （三）严防中毒，注意安全 （1）领用剧毒试剂应按规定办理审批手续后领取，并由专人妥善保管。 （2）使用毒性物质和致癌物质必须根据试剂瓶上标签说明严格操作，安全称量、转移和保管。操作时应戴手套，必要时戴口罩或防毒面罩，并在通风橱中进行，使用后的容器应单独清洗、处理。 （四）小心处理生物化学实验废弃物 生物材料，如微生物、动物的组织、细胞培养液、血液、分泌物，以及实验动物等都可能存在细菌和病毒感染的潜在性危险。实验完成后，被污染的物品必须进行高压消毒灭菌或烧成灰烬，被污染的玻璃器皿应高压灭菌之后再清洗。 （五）教学科研资料，妥善收藏 教学科研资料是科研人员艰苦劳动的文字记录或视听记载、实物证据，应妥善保藏。 二、实验室急救 （一）实验中不慎受伤，应立即采取适当的急救措施 （1）受玻璃割伤或其他机械损伤。首先检查伤口内是否有玻璃或金属碎片，然后用硼酸水洗净，再涂擦碘酒或红药水，必要时用纱布包扎。如伤口较大或过深而大量出血，应迅速在伤口上部和下部扎紧血管止血，立即送往医院诊治。 （2）烫伤。轻度烫伤一般可涂上苦味酸软膏。如果伤口红痛或红肿（一级灼伤），可擦医用橄榄油；若皮肤起泡（二级灼伤），不要弄破水泡，防止感染；若伤处皮肤呈棕色或黑色（三级灼伤），应用干燥而无菌的消毒纱布轻轻包扎好，紧急送医院治疗。 （3）化学试剂灼伤。强碱和碱金属引起的灼伤，先用大量的自来水冲洗，再用5％硼酸溶液或2％乙酸溶液涂洗。强酸、溴等引起的灼伤，立即用大量的自来水冲洗，再用5％碳酸氢钠溶液或5％氢氧化铵溶液洗涤。酚触及皮肤引起灼伤可用乙醇洗涤。 （4）被实验动物咬伤。被咬后立即挤压伤口排去带毒液的污血，然后用20％肥皂水或0.1％新洁尔灭彻底清洗，再用清水洗净，继用2％～3％碘酒或75％乙醇局部消毒。为确保安全，必须及时去防疫部门接种疫苗。 （二）实验室常备急救药品 为了对实验室意外事故进行紧急处理，实验室应配备急救药箱，常备药品清单如下。 （1）红药水。将20g红汞加入800mL无离子水中，搅拌使之溶解后定容至1000mL。配制时勿将红汞一次完全倒入水中，以免结块。红药水有止血、消毒的功能。 （2）碘酒。碘25g，碘化钾 10g，乙醇500mL，水加至1000mL。配制时应先将碘化钾溶解于10mL水中，配成饱和溶液，再将碘加入碘化钾溶液中，*后加入乙醇搅拌溶解，再定容至1000mL。 （3）烫伤膏。 （4）饱和碳酸氢钠溶液。 （5）5％硼酸溶液。 （6）2％醋酸溶液。 （7）5％氨水。 （8）5％硫酸铜溶液。 （9）高锰酸钾晶体（需要时再制成溶液）。 （10）甘油。 （11）消炎粉。 （12）泻药（如硫酸镁等）。 （13）催吐剂。镁浆或氧化镁甘油浆液（将200g氧化镁与240g甘油混合）。万能解毒剂（医用活性炭：氧化镁：单宁酸=2：1：1，混合后，保存于干燥处）。 （张瑞英） 第三节 生物化学实验报告 一、生化实验记录 （1）实验前必须认真预习，弄清目的、原理和操作步骤，写出扼要的预习报告，操作时作为提示和参考。 （2）准备好便于保存的记录本。记录实验条件，如材料的名称和来源，仪器的名称、生产厂家、规格、型号，化学试剂的规格、浓度、pH等，并如实记录实验中观察到的现象、测试的数据等。 （3）如果怀疑测定结果不正确或数据记录不完整，有条件时需重做实验。 二、数据处理 （一）表格 应以图表的形式记录实验数据或概括实验结果。表格设计要求紧凑、简明，一般用三线表，要有编号和表头（表1-1）。 表1-1 考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度标准曲线加样表 （二）绘图 许多实验需要测量一个量对另一量的影响。已知量叫做自变量，未知量或待测量叫做因变量。画图时，习惯把自变量画在横坐标（x轴）上，而把因变量画在纵坐标（y轴）上。应使用Office中Excel软件绘图。例如，将表1-1数据绘图，结果如图1-1所示。 图1-1蛋白质含量测定标准曲线 （三）图谱 在实验报告中，层析或电泳的结果经常以图谱表示（图1-2、图1-3）。绘制层析、电泳图谱时，图片大小可酌情缩放，但层析斑点、电泳区带形状、位置、颜色及其深度背景颜色等应力求与原物一致。*好对图谱进行照相或扫描。对图谱中条带或斑点要有注解，一般在图谱的下方列出项目，两边用相应的直线指出条带或斑点。 三、基础生化实验报告 学生在实验结束后要及时整理实验数据，总结实验结果，并对结果进行分析，写出实验报告。生化实验报告书写格式如下。 四、综合性生化实验报告 一个综合性实验相当于一个微型毕业实践题目，基础生化实验报告的格式已经不适合综合性实验。我们要求学生按照国家公开发表的核心期刊研究论文格式书写，以提高学生写作水平，为将来完成毕业论文打好基础。 综合性生化实验报告包括以下部分)题目、作者及单位、中文摘要及关键词、英文摘要及关键词、前言、材料与方法、结果与讨论、参考文献。 每一部分的要求如下。 1.题目 每一次实验的题目。 2.作者 一个综合性实验的合作者 两位同学"。 3.单位 ××大学和××学院，城市，邮编。 4.中文摘要及关键词 总结本次实验的主要内容，采用××技术，取得了××结果，得出××结论。关键词是本次实验涉及的*核心的专业词语。 5.英文摘要及关键词 以英文书写本次实验的摘要，与中文部分内容对应，切忌逐字翻译。英文关键词与中文关键词相对应。 6.前言 写明本次实验研究对象有什么性质、用途、研究其的重要意义及目前的研究现状等。 7.材料与方法 详细写明所用材料及实际采用的方法。分条目写。