植物病害组织制片技术

前言
一、植物病害组织制片的准备工作
（一）基本仪器设备和试剂
1.仪器设备
2.常用试剂
3.常用染料
4.薄切片制片法与超薄切片制片法常用试剂
（二）植物病害组织制片标本的采集和取材
1.植物病害切片标本的采集
2.切片材料的选择与分割
（三）制作切片注意事项

二、植物病害组织制片的一般原理
（一）固定与固定液
1.选择理想固定液的几个原则
2.配制固定液的常用试剂
3.常用固定液
4，固定时应注意事项
（二）脱水与脱水剂
1.脱水的作用
2.常用脱水剂
（三）透明与透明剂
（四）石蜡渗透与石蜡
1.石蜡渗透的原则
2.渗透与包埋所用的石蜡
（五）制片的其他试剂
1.粘贴剂
2.封固剂
3.漂白剂
4.软化剂

三、植物病害组织切片染色
（一）染色原理
1.染色的必要性
2.染色原理
3.染料的性质
4.染料的种类
（二）常用染料
1.苏木精
2.番红
3.固绿
4.亮绿
5.亚甲绿
6.甲基绿
7.橘红G
8.碱性品红
9.酸性品红
10.苯胺蓝
11.苏丹Ⅲ和苏丹Ⅳ
12.俾斯麦棕
13.钉红
14.曙红
15.刚果红
16.孔雀绿
17.马蒂阿黄
18.硫堇
（三）染色方法与步骤
1.染色方法的种类
2.染色缸的组合及排列
3.染色剂及染色步骤

四、植物病害组织制片技术
（一）石蜡制片法
1.固定
2.脱水
3.透明
4.石蜡渗透
5.石蜡包埋
6.切片
7.粘片与展片
8.染色
9.封固
（二）快速石蜡制片法
1.固定
2.脱水和透明
3.石蜡渗透
4.石蜡包埋
5.切片
6.粘片与展片
7.染色
8.封固
（三）整体封固制片法
1.病原真菌整体封固制片法
2.病原细菌玻片制作法
3.线虫整体封固制片法
（四）徒手切片制片法
1.材料
2.方法与步骤
（五）冰冻切片制片法
1.冰冻制片具体步骤
2.冰冻制片时注意事项
（六）薄切片制片法
1.固定
2.脱水
3.渗透与包埋
4.切片
5.染色和封固
（七）超薄切片制片法
1.固定液及材料的固定
2.脱水
3.渗透
4.包埋
5.聚合
6.切片
7.染色
（八）病原体负染膜制作法
1.病毒粒体负染膜制作法
2.细菌与真菌孢子悬液负染膜制作法
3.福尔马膜的制备

附录
附录1 玻璃器皿的洗涤
附录2 各级浓度酒精的配制
附录3 石蜡切片切削质量不佳的原因分析和解决方法
附录4 切片厚度与室温及石蜡熔点的关系
主要参考文献