精编蛋白质科学实验指南

译者的话前言参编者推荐的背景读物 第1章 蛋白质纯化和定性的策略1．1 单元 蛋白质纯化和定性概述目标和研究对象蛋白质纯化的原料蛋白质的检测和分析蛋白质分离和纯化方法蛋白质产物的定性蛋白质纯化实验室1．2 单元 蛋白质纯化流程图可溶性重组蛋白不可溶性重组蛋白可溶性非重组蛋白膜相关的和不可溶性重组蛋白第2章 计算分析2．1 单元 用于蛋白质序列分析的疏水分布图方法学应用结论2．2 单元 蛋白质二级结构预测二级结构预测的方法二级结构预测方法的应用2．3 单元 使用BLAST程序家族进行序列相似性搜索进入BLAST程序和文档BLAST介绍BLAST程序2．4 单元 因特网上的蛋白质数据库蛋白质结构数据库蛋白质家族数据库2．5 单元 蛋白质三级结构预测同源性建模序列分布图法线程法从头结构预测2．6 单元 蛋白质三级结构建模词汇进入SwissModel程序和文档ExPDB数据库创建首次法建模查询的格式观看SwissModel结果2．7 单元 比较蛋白质结构预测比较建模的步骤 第3章 检测和分析方法3．1 单元 分光光度法确定蛋白质浓度基本方案1 计算一个蛋白质的摩尔吸收系数基本方案2 折叠蛋白质摩尔吸收系数的测定基本方案3 使用摩尔吸收系数通过吸收光谱测定蛋白质的浓度基本方案4 通过205nm处的吸收光谱测定蛋白质的浓度基本方案5 粗蛋白质提取液总蛋白质浓度的测定3．2 单元 定量氨基酸分析样品制备平均组成的计算3．3 单元 肽和蛋白质的体外放射标记基本方案1 使用碘珠对酪氨酸或组氨酸残基进行碘化备择方案1 用氯胺T或Iodogen在酪氨酸或组氨酸残基碘化备择方案2 使用乳酸过氧化物酶在酪氨酸或组氨酸残基碘化辅助方案1 等摩尔碘化以获得产物的高收率辅助方案2 用HPLC从碘化产物中分离未标记的肽基本方案2 用Bolton-Hunter试剂在赖氨酸残基或N端碘化基本方案3 通过酸酐乙酰化在赖氨酸残基或N端进行14C或3H标记备择方案3 通过还原性烷基化在赖氨酸残基或N端进行14C或3H标记备择方案4 用碘乙酸或碘乙酰胺在赖氨酸残基进行14C或3H标记基本方案4 在肽合成过程中引入标记的氨基酸残基备择方案5 在肽合成过程中在N端进行选择性标记3．4 单元 总蛋白质的分析基本方案1 总蛋白质定量的双缩脲分析基本方案2 总蛋白质定量的Hartree-Lowry分析基本方案3 总蛋白质定量的二喹啉甲酸（BCA）分析基本方案4 总蛋白质定量的酸消化——茚三酮法辅助方案1 热封玻璃管基本方案5 测量总蛋白质的考马斯染料结合分析（Bradford分析）辅助方案2 蛋白质样品的凝胶透析…… 第4章 提取、稳定和浓缩第5章 重组蛋白的生产第6章 重组蛋白的纯化第7章 重组蛋白的定性第8章 常规层析分离第9章 亲和层析第10章 电泳第11章 化学分析第12章 翻译后修饰：糖基化第13章 翻译后修饰：磷酸化和磷酸酶第14章 翻译后修饰：特定的应用第15章 蛋白质的化学修饰第16章 质谱第17章 肽的制备和处理第18章 蛋白质互相作用的鉴定第19章 蛋白质相互作用的定量第20章 肽酶第21章 基于凝胶的蛋白质组分析附录1 试剂和溶液附录2 常用的度量制和数据附录3 常用技术附录4 试剂和设备供货商参考文献索引