纳他霉素生物合成的代谢调控

**章概述
**节纳他霉素的概述1
一、纳他霉素的发现1
二、纳他霉素的化学结构与理化性质1
三、纳他霉素的抑菌机理2
四、纳他霉素的抑菌特点3
五、纳他霉素的应用3
第二节纳他霉素的生物合成和代谢调控4
一、纳他霉素的产生菌株4
二、纳他霉素的生物合成途径5
三、纳他霉素的代谢工程和半合成衍生物10
四、代谢调控机制12
第三节纳他霉素产量提高的方式、提取和检测17
一、纳他霉素产量提高的方法17
二、纳他霉素分离提取概况22
三、纳他霉素的检测22
第四节展望23

第二章促进纳他霉素生物合成的真菌诱导子筛选和鉴定
**节真菌诱导子概述26
一、真菌诱导子的定义26
二、真菌诱导子的应用26
第二节促进纳他霉素合成的真菌诱导子筛选28
一、纳塔尔链霉菌及真菌培养特征的测定28
二、固定化酿酒酵母与纳塔尔链霉菌共培养34
三、真菌制备产物对纳他霉素合成的影响37
第三节真菌诱导子有效成分的分离与鉴定42
一、真菌诱导子有效成分的稳定性研究42
二、产黄青霉制备物中诱导子的分离44
三、真菌诱导子的化学结构研究47

第三章真菌诱导子对S.natalensis HW-2的影响
**节真菌诱导子对S.natalensis HW-2的生理生化的影响55
一、真菌诱导子添加工艺的优化55
二、真菌诱导子对S.natalensis HW-2菌落和菌丝形态影响56
三、真菌诱导子对纳他霉素发酵过程的影响58
四、真菌诱导子对胞内ROS的影响58
五、真菌诱导子对胞内Ca2+含量的影响59
六、真菌诱导子对关键酶活的影响60
第二节真菌诱导子对S.natalensis HW-2转录水平的影响61
一、取样时间的确定62
二、RNA的提取与质检62
三、基因水平表达定量64
四、差异表达基因分析统计64
五、差异基因的GO功能注释66
六、差异基因的KEGG代谢通路分析68
七、GO富集和Pathway富集分析70
八、转录组测序的qRT-PCR验证77

第四章支链氨基酸对纳他霉素生物合成的影响
**节支链氨基酸概述80
一、支链氨基酸的定义80
二、支链氨基酸在抗生素发酵中的应用80
三、支链氨基酸的作用机理80
第二节支链氨基酸对纳他霉素生物合成的影响81
一、支链氨基酸对纳他霉素产量的影响81
二、缬氨酸添加时间的优化82
三、缬氨酸对S.natalensis HW-2发酵过程的影响83
四、缬氨酸对糖酵解的影响84
五、缬氨酸对三羧酸循环的影响86
六、缬氨酸对胞外短链脂肪酸前体的影响87
七、缬氨酸对乙酰辅酶A生成的影响88
第三节L-缬氨酸对S.natalensis HW-2转录水平的影响89
一、取样时间确定90
二、原始数据质量评估90
三、差异基因表达分析统计92
四、GO富集分析92
五、KEGG富集分析95
六、qRT-PCR验证103
七、总结105

第五章纳他霉素原位吸附及发酵工艺优化
**节大孔树脂吸附动力学和原位吸附工艺106
一、大孔树脂含水量测定106
二、树脂的吸附与解吸107
三、大孔树脂原位发酵工艺的优化110
第二节发酵培养基和发酵工艺优化111
一、发酵培养基优化111
二、响应面法优化发酵培养基组成117

第六章纳他霉素高产菌株的选育
**节纳他霉素生产菌株的诱变122
一、纳塔尔链霉菌的诱变122
二、突变菌株的发酵过程曲线128
第二节差异菌株的转录组学分析129
一、测序数据质量评估130
二、基因水平表达分析131
三、差异基因表达分析134
四、突变菌株的主要代谢通路的变化141
五、qRT-PCR验证144

参考文献