生物化学综合实验/谭志文

绪论1

**章核酸类综合实验5
项目一真核生物的分子鉴定5
实验一黄酒酵母形态学观察6
实验二黄酒酵母的分子生物学鉴定7
项目二原核生物——细菌的系统发育关系分析12
实验一细菌基因组的提取及琼脂糖凝胶电泳15
实验二细菌16S rDNA序列的PCR扩增16
实验三16S rDNA-ITS基因片段的纯化17
实验四16S rDNA重组载体的构建与转化19
实验五阳性克隆的筛选20
实验六系统发育树构建21
项目三全基因组的提取及效果评价——以火龙果为例27
实验一火龙果基因组的提取29
实验二火龙果基因组的ISSR PCR扩增31
项目四植物转基因成分的检测33
实验一大豆基因组的提取36
实验二定性PCR检测37
项目五真核生物RNA的提取及分析——以脊尾白虾为例40
实验一脊尾白虾的RNA提取41
实验二RNA电泳42

第二章蛋白质类综合实验45
项目一终止法测定酶活性——以酵母蔗糖酶为例45
项目二连续法测定酶活性——以碱性磷酸酶为例47
项目三细菌苹果酸脱氢酶的研究50
实验一苹果酸脱氢酶活力测定52
实验二苹果酸脱氢酶的提取纯化54
实验三苹果酸脱氢酶的电泳检测55
实验四苹果酸脱氢酶*适pH值的测定57
实验五苹果酸脱氢酶*适温度的测定57
实验六米氏常数及*大反应速度的测定58
项目四脊尾白虾精氨酸激酶的分离纯化与酶学性质研究60
实验一精氨酸激酶的提取与分离纯化60
实验二精氨酸激酶的活性测定63
实验三精氨酸激酶的酶学性质测定64
项目五鸡卵黄免疫球蛋白的分离纯化与活性测定66
实验一IgY粗品制备及纯化67
实验二蛋白质浓度测定（一）69
实验三蛋白质浓度测定（二）71
实验四免疫球蛋白的活性测定72
项目六固定化葡糖异构酶生产果葡糖浆及评价74
实验一固定化葡糖异构酶生产果葡糖浆75
实验二固定化葡糖异构酶的评价指标78

第三章糖类综合实验81
项目一海藻多糖研究81
实验一海藻多糖提取82
实验二海藻多糖的含量测定84
实验三还原糖的测定85
实验四海藻多糖的单糖成分分析88
实验五海藻多糖的红外光谱分析89
实验六多糖清除·OH能力测定90
实验七多糖的铁离子还原能力测定91
实验八多糖清除DPPH·能力测定92
项目二食用菌多糖的提取与分离纯化——以平菇为例94

第四章脂类综合实验——植物油脂的研究98
实验一杏仁油脂的提取101
实验二油脂皂化价的测定102
实验三油脂酸价的测定104
实验四油脂碘值的测定105
实验五油脂过氧化值的测定106
实验六油脂脂肪酸的气相色谱分析108

第五章维生素类综合实验110
项目一吡咯喹啉醌的研究110
实验一PQQ的提取纯化111
实验二PQQ的高效液相分析112
实验三NBT-Gly法测定PQQ含量113
项目二紫外分光光度法测定维生素C含量114

附录118
附录一常用仪器使用方法118
附录二常用缓冲溶液的配制方法127
附录三硫酸铵饱和度表133
附录四化学试剂规格134

参考文献136