药用植物学与生药学实验及学习指导

**部分 实验指导 实验须知 实验室规则 1.进实验室前，必须预习实验内容，明确实验目的，了解实验的基本原理、内容和方法。 2.实验室中应保持安静，不许抽烟，不许大声喧哗，精力要集中，不得擅自离开操作台。 3.保持实验室桌上的整洁，爱护显微镜和一切工具，不得随意浪费实验材料和药品。 4.实验报告必须在实验室内完成，不得抄袭。 5.每次实验完毕后，切片要从载物台取下，归还切片盒，桌上一切用具应拭洗干净，并归还原处，学生轮流值日，离开实验室前一定要检查门、窗、水、电是否关闭。 实验报告的写作法 1.按照每次实验报告要求，在纸上绘图或写成报告。 2.绘图时，估计每次实验中需绘图数目的多少，在纸上适当分配绘图位置。 3.注意所绘的图与实物大小的比例，绘图时铅笔要预先削尖，线条要用平滑的单线，避免一切模糊、紊乱的线条或阴影。 4.绘图时应力求真实，不得抄袭书本或他人作业，字体要端正，图的排列要求整齐清洁，注明各图的名称，并用平行线向右引注各部的名称。 实验一 植物细胞的显微结构 [目的要求] 1.初步掌握植物细胞的基本结构。 2.掌握细胞壁性质的鉴别方法。 3.通过本实验了解显微镜的构造、性能及使用方法。 [实验材料与仪器] 1.仪器与器材 显微镜、镊子、解剖针、刀片、载玻片、盖玻片、培养皿、吸水纸、酒精灯。 2.试药 碘-碘化钾试液、甲基蓝染液、10%碘甘油、苏丹Ⅲ试液、95%乙醇、稀甘油、α-萘酚、浓硫酸、水合氯醛试液、间苯三酚、钌红、氯化锌碘液。 3.材料 洋葱鳞茎或大葱鳞茎、马铃薯块茎、亚麻种子、桔梗根、大丽菊块根；半夏粉末、浙贝粉末、大黄粉末、黄柏粉末、大葱干燥膜质鳞叶、木贼茎、梨果肉、黄柏栓皮。 [实验内容] 一、洋葱表皮细胞的制片 取洋葱鳞茎，用刀片在其内表皮轻轻划开几个边长约为0.5cm的小方块，然后用镊子夹住一边，轻轻撕取，选取*薄的一块迅速放在滴有蒸馏水的载玻片上，要使表皮平展，如有重叠或被折可用解剖针将其展平，然后再用盖玻片封片。 二、观察洋葱鳞叶表皮细胞的基本结构 将制好的洋葱表皮装片置于显微镜下进行观察，可见以下几部分： 1.细胞壁 洋葱表皮细胞的细胞壁几乎为无色透明的，在显微镜下观察仅能看到每一细胞的四壁组成的轮廓，而上下两层细胞壁看不到。所看到的细胞壁实际是由两相邻细胞共同组成，它包括两相邻细胞的两层初生壁，以及两相邻细胞所具有的胞间层，故所见细胞壁为三层结构。 2.细胞质 在成熟的细胞中，细胞质为紧贴细胞壁薄薄的一层，可见到细胞核位于其中，并可看到许多细小颗粒。 3.细胞核 为半透明状圆形的小物体，因其有较强的折光性，比细胞质容易看见。在细胞核内还可明显地看到1至多个颗粒状核仁。 4.液泡 在未成熟细胞中常见到数个小液泡在细胞内分散存在。在成熟的细胞中，液泡常占据中央的绝大部分，它将细胞质、细胞核等挤向紧贴细胞壁处。 三、碘-碘化钾试液或甲基蓝染液染色观察 用碘-碘化钾试液或甲基蓝染液代替蒸馏水直接装片，或在已经用蒸馏水制好的装片进行。将碘-碘化钾试液或甲基蓝染液滴在盖玻片的一侧，在盖玻片的另一侧用吸水纸将水吸出，不断使其试液流入盖玻片下，使细胞染色，经染色后，细胞核染色较深，细胞质染色较浅，液泡不被染色，使细胞内的结构更为清晰。 四、木质化细胞壁 木质化细胞壁主要是由木质素沉积于细胞壁上面所形成，多为次生壁。具木质化细胞壁的成熟细胞多为死细胞，如导管、管胞、木纤维、石细胞等。这些类型的细胞由于壁较为坚硬，不易破坏，又因为各种细胞具有不同的形态特征，往往是各类粉末药材的重要鉴定依据。 取梨果肉少许于载玻片上，并用解剖针将果肉轻轻捣碎，滴加间苯三酚和浓硫酸各1滴，封片后镜检，可见许多具有极厚木化壁的细胞成团或散在，均被染成樱红色或紫红色。 五、木栓化细胞壁 木栓化细胞壁是由于渗入了脂肪性木栓质的结果。木栓细胞多位于植物体根和茎的表面，通常排列整齐、紧密，无细胞间隙，细胞壁较厚，也是组织和药材粉末常用的鉴定依据。 取黄柏的栓皮或马铃薯块茎做徒手切片，选取较薄的组织切片置于载玻片上，滴加苏丹Ⅲ试液1滴，在酒精灯上轻轻加热后封片，观察颜色变化，并与角质化细胞壁比较有什么不同。 六、角质化细胞壁 角质化细胞壁是指细胞产生的一些脂肪性物质，不但填充到细胞壁内，又常在植物某些器官的表皮外侧形成一层角质，又叫角质层。角质层的薄厚往往与植物种类及生态环境有关，实验中所观察到*明显的部分主要是角质层。 取夹竹桃叶片做横切片，置于载玻片上，滴加苏丹Ⅲ试液1滴，在酒精灯上加热，稍放片刻，加稀甘油1滴封片观察。可清楚地看到叶的上下表皮外侧有一条紧紧与表皮细胞连到一起的橙红色亮带，这便是角质层。 七、矿质化细胞壁 在某些植物细胞壁内常含有大量的硅质或钙质等，其中含有硅质的细胞较多。 细胞所含有的二氧化硅可溶于氟化氢溶液，但不溶于醋酸或浓硫酸，用这种方法可鉴别硅质是否存在，同时也是用于与草酸钙和碳酸钙晶体区别的方法之一。 八、黏液化细胞壁 黏液化细胞壁是细胞壁所含有的纤维素和果胶质等成分发生变化而成黏液质胶和树脂类物质，这类物质遇水膨胀并有部分溶解，因此在制片过程中要用乙醇装片观察。 取亚麻种子做横切片，加钌红试液1滴装片观察。因钌红试剂可将黏液质染成红色，故可确定所观察到的被染成红色的种子外表皮为黏液化细胞壁。 [作业] 1.绘3～4个洋葱表皮细胞，并注明各部分名称。 2.简述几种细胞壁的显微化学鉴别方法。 [思考题] 1.植物细胞的显微构造有何特点？ 2.植物细胞与动物细胞在结构上有何区别？