磷脂酰胆碱在LET-607寿命调控通路中的作用和机制研究

1 绪论 1.1 秀丽隐杆线虫 1.2 内质网应激反应 1.2.1 IRE 1.2.2 PERK 1.2.3 ATF 1.2.4 秀丽隐杆线虫的内质网应激反应 1.3 DAF-16／FOXO 1.3.1 DAF-16 1.3.2 FOXO 1.4 CREBH／LET-607 1.4.1 CREBH 1.4.2 LET-607 1.5 磷脂酰胆碱 1.6 立题依据及研究意义 1.6.1 立题依据 1.6.2 研究意义 2 材料与方法 2.1 秀丽隐杆线虫品系及其培养条件 2.2 实验室用水 2.3 秀丽隐杆线虫生长培养基的制备 2.4 OP50-1菌株和RNA干扰菌株培养皿的制备 2.5 LB培养基 2.6 M9缓冲液（M9 Buffer） 2.7 S缓冲液（S Buffer） 2.8 秀丽隐杆线虫基因组提取液（2X Lysis Buffer） 2.9 PBS缓冲液（PBS Buffer） 2.10 Haira's溶液（Hajra's Solution） 2.11 10％TritonTM X-100溶液 2.12 50xTAE电泳缓冲液 2.13 尼罗红（Nile Red）染料 2.14 油红O（Oil-Red-O）染料 2.15 秀丽隐杆线虫脂肪尼罗红染料染色 2.16 秀丽隐杆线虫脂肪油红O染料染色 2.17 秀丽隐杆线虫脂肪油红O染料染色定量 2.18 大肠杆菌感受态细胞的制备 2.19 秀丽隐杆线虫基因组提取 2.20 秀丽隐杆线虫冷冻保存与复苏 2.2 l秀丽隐杆线虫拍照 2.22 秀丽隐杆线虫体长测量实验 2.23 秀丽隐杆线虫同步化处理 2.24 秀丽隐杆线虫RNA提取 2.25 链cDNA合成 2.26 荧光定量PCR（QPCR） 2.27 转录组测序 2.28 ChIP-seq分析 2.29 气相色谱串联质谱分析法（GC-MS／MS） 2.30 脂肪酸分析 2.31 薄层色谱法（TLC） 2.32 秀丽隐杆线虫应激实验