包邮酵母遗传学方法实验指南(第二版)

目录
遗传学命名法 1
实验篇
实验一 酵母细胞的观察 5
实验二 营养缺陷型、温度敏感型和渗透压敏感型突变株的分离和鉴别 12
实验三 减数分裂作图 20
实验四 有丝分裂重组和随机孢子分析 30
实验五 酵母转化 39
实验六 合成致死突变体 47
实验七 基因置换 52
实验八 ras2抑制基因的分离 68
实验九 细胞型操作 76
实验十 用插入诱变法分离突变体 85
实验十一 利用双杂交差异互作筛选以分离功能突变体 91
技术和方案篇
技术和方案1 酵母的高效转化 98
技术和方案2 快速粗放的酵母菌落质粒转化法 100
技术和方案3 酵母DNA分离 101
技术和方案4 酵母蛋白质的抽提 107
技术和方案5 TAP纯化方法 108
技术和方案6 酵母RNA的分离 111
技术和方案7 质粒DNA的短胶突变 115
技术和方案8 酵母β-半乳糖苷酶的测定 116
技术和方案9 羧肽酶Y 的平板鉴定 120
技术和方案10 随机孢子分析 121
技术和方案11 酵母活细胞染色 122
技术和方案12 酵母免疫荧光法 124
技术和方案13 已固定细胞的肌动蛋白染色 127
技术和方案14 PCR介导基因破坏法 129
技术和方案15 酵母菌落PCR 133
技术和方案16 分光光度法测酵母细胞密度 134
技术和方案17 细胞同步化 136
技术和方案18 染色质免疫沉淀 138
技术和方案19 酵母DNA 流式细胞记数 143
技术和方案20 对数生长 145
技术和方案21 EMS 诱变 146
技术和方案22 四分体解剖 148
技术和方案23 制备四分体解剖针 150
技术和方案24 挑取合子 152
技术和方案25 测定铺板效率 153
技术和方案26 小量提取E.coli DNA 154
技术和方案27 E.coli感受态的制备与转化 156
技术和方案28 系统缺失菌株的保存及操作 159
附录A 培养基 161
附录B 菌株保存 171
附录C 酵母遗传图谱和物理图谱 172
附录D 平板划线模板 179
附录E 菌株核型分析电泳的Southern 印迹作图 181
附录F 菌株 183
附录G 用标准血球计数板进行酵母细胞计数 186
附录H 四分孢子计分表 187