生物化学与分子生物学实验教程

**章　核酸提取
**节　基因组DNA的制备
一、制备植物细胞基因组DNA
二、制备动物细胞基因组DNA
三、制备细菌基因组DNA
四、制备酵母基因组DNA（以Pichia pastoris基因组DNA提取为例）
五、结果分析
六、基因组DNA提取注意事项
第二节　RNA的制备
一、动物物RNA提取（以人脐带组织总RNA的抽提为例）
二、植物RNA的分离
三、绿色叶片植物叶线粒体RNA的分离
四、酵母RNA分离
五、酵母tRNA制备（苯酚法）
六、细菌RNA分离
七、结果分析
第三节　质粒DNA制备
一、大肠杆菌质粒DNA制备（碱裂解法）
二、农杆菌质粒DNA提取
三、结果分析
第二章　cDNA文库构建
**节　应用常规方法构建cDNA文库
一、原理
二、cDNA**条链的合成
三、cDNA第二条链的合成
四、补平cDNA链末端
五、cDNA甲基化
六、cDNA与接头或衔接子相连接
七、凝胶过滤分离cDNA
八、cDNA与入噬菌体臂的连接
九、重组子的筛选与鉴定
　第二节　构建cDNA文库新方法
　一、减数cDNA文库
二、标准化cDNA文库
第三节　cDNA文库构建及应用实例
一、主要材料
二、实验操作要点
三、结果及分析
第三章 已知目标DNA片段的获取
**节　PCR法扩增目标DNA片段
一、原理
二、PCR条件
三、引物设计原则
四、PCR反应特点
五、试剂
六、温度与时间的设置
七、PCR扩增效果的检查
八、注意事项
九、用PCR扩增目标基因实例
十、PCR技术扩展
　第二节　基因的化学合成
一、磷酸二酯法
二、磷酸三酯法
三、固相亚磷酸三酯法
四、用寡核苷酸片段组装
第四章 已知部分序列的DNA片段的获取
**节 RACE
一、5’RACE
二、3’RACE
三、RACE方案的PCR优化
四、RACE应用实例
第二节　染色体步移
一、原理
二、材料
三、实验操作
第三节　反向PCR
一、原理
二、材料
三、实验操作
四、反向PCR应用实例
第四节　锚定PCR
一、原理
　……
第五章　未知DNA片段的获取　
第六章　RNAi技术
第七章　DNA重组
第八章　生产重组蛋白
第九章　纯化技术
第十章　电泳技术
第十一章　杂交技术
第十二章　生物质谱技术
第十三章　生物芯片
第十四章　噬菌体展示技术
第十五章　生命大分子相互作用分析
第十六章　生物信息学概况及生物信息数据库