生化分离原理与技术(第二版)(本科教材 )

**章 绪论 1 一、生化分离技术发展的历史和地位 1 二、 生化分离技术的研究范畴 2 三、生化分离技术的应用及发展趋势 5 参考文献 8 **篇 生物样品粗分离 第二章 生物样品的预处理 10 **节 概述 10 第二节 生物样品体系的改变 10 一、加热法 11 二、调节pH值法 11 三、凝聚和絮凝 11 四、添加助滤剂法 13 五、添加反应剂法 14 第三节 固液分离 14 一、离心分离技术 14 二、过滤分离技术 22 第四节 细胞的破碎 27 一、概述 27 二、细胞破碎常用方法 27 三、破碎方法发展趋势 32 第五节 不同材料预处理 33 一、植物材料 33 二、动物组织 36 三、微生物发酵液 38 第六节 预处理实例 42 一、纳米级微生物细胞破碎原理及实例 42 二、β-环糊精共沉淀分离法 43 三、壳聚糖沉淀分离法 43 参考文献 44 第三章 沉淀 45 **节 概述 45 第二节 沉淀方法 45 一、盐析法 46 二、有机溶剂沉淀法 51 三、等电点沉淀法 53 四、非离子多聚物沉淀法 54 五、选择性变性沉淀 55 六、生成盐类复合物的沉淀 55 七、亲和沉淀 56 参考文献 57 第四章 膜分离技术 58 **节 概述 58 一、发展史 58 二、作用及存在问题 59 三、分类和定义 59 第二节 技术原理 63 一、压力特征 63 二、浓差极化 64 三、膜分离理论 64 四、膜的截留能力 65 五、膜的污染 66 六、膜组件的选择 67 七、膜的选择及使用 67 第三节 微滤技术 69 一、概述 69 二、膜的分类 70 三、膜的特点和分离机理 71 四、膜的污染和清洗 71 第四节 超滤技术 72 一、概述 72 二、原理 72 三、问题及解决措施 72 四、膜的改性 73 第五节 纳滤技术 74 一、概述 74 二、分离机理 74 三、纳滤膜 76 第六节 超-微滤操作技术 76 一、预处理 76 二、膜的操作 77 三、膜的清洗和膜性能的再生 80 第七节 膜分离技术的应用 81 一、微滤技术应用 81 二、超滤技术应用 83 三、纳滤技术应用 86 参考文献 87 第二篇 生物样品纯化 第五章 层析分离技术 89 **节 概述 89 一、层析的基本概念 89 二、层析法的分类 90 第二节 吸附层析 91 一、吸附层析影响因素 91 二、羟基磷灰石层析方法介绍 93 第三节 凝胶过滤层析 95 一、GFC原理 95 二、GFC介质 98 三、GFC实验技术 107 四、GFC的应用 113 第四节 离子交换层析 115 一、IEC相关理论 115 二、IEC介质 119 三、IEC实验技术 128 四、IEC的应用 143 第五节 亲和层析 144 一、基本原理 144 二、亲和配体 145 三、亲和吸附剂 146 四、AFC实验技术 154 五、AFC的特殊类型 156 六、AFC的应用 168 第六节 反相层析 170 一、RPC原理 171 二、RPC介质 175 三、RPC流动相 178 四、RPC实验技术 180 五、RPC的应用 185 第七节 疏水作用层析 187 一、HIC基本原理 187 二、HIC介质 191 三、HIC实验技术 193 四、HIC的应用 197 参考文献 198 第六章 电泳技术 201 **节 概述 201 一、基本原理 201 二、凝胶介质 203 三、检测方法 205 四、电泳仪器 205 第二节 天然聚丙烯酰胺凝胶电泳 206 一、基本原理 207 二、天然PAGE的类型 208 三、影响分离效果的因素 208 四、蛋白质分子量的测定 210 五、天然PAGE的实验方法 210 六、天然PAGE的应用范围 214 第三节 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 215 一、SDS-PAGE的分离原理 215 二、SDS-PAGE的类型 215 三、影响分离效果的因素 216 四、蛋白质亚基分子量的测定 217 五、SDS-PAGE的实验方法 217 六、SDS-PAGE的应用范围 218 第四节 等电聚焦 219 一、原理 219 二、载体两性电解质和pH梯度的形成 220 三、载体两性电解质等电聚焦方法 222 四、固相pH梯度介质及其pH梯度的形成 225 五、固相pH梯度等电聚焦方法 227 六、等电聚焦系统的选择 229 七、等电聚焦的应用范围 229 第五节 双向电泳 229 一、样品制备 229 二、等电聚焦 230 三、缓冲液置换 231 四、梯度SDS-PAGE 232 五、检测 232 六、蛋白质图谱分析 232 七、应用 233 第六节 蛋白质印迹 233 一、原理 233 二、试验材料的选择 235 三、蛋白质印迹试验方法 236 四、应用 238 第七节 毛细管电泳 238 一、原理 238 二、毛细管电泳的主要类型 240 三、毛细管电泳仪 241 四、影响毛细管电泳分离的主要因素 242 五、毛细管电泳过程 243 六、毛细管电泳的应用 243 参考文献 244 第三篇 分离技术的融合与集成 第七章 单元融合及创新 246 **节 膜层析技术 246 一、概述 246 二、原理和特点 246 三、膜层析介质材料及其组件 248 四、膜层析的制备 249 五、膜层析的应用 250 第二节 与双水相集成的分离技术 252 一、双水相亲和分配技术 252 二、双水相生物转化的集成 253 第三节 混合模式吸附层析 253 一、概述 253 二、离子交换型混合模式层析 254 三、亲硫作用层析 256 四、疏水性电荷诱导层析 257 第四节 扩张床吸附层析 259 一、扩张床吸附层析的基本原理 259 二、扩张床吸附技术的操作 260 三、扩张床基质的特性 261 四、扩张床吸附技术的应用 263 第五节 模拟移动床 264 一、概述 264 二、工作原理 265 三、模拟移动床模型 266 四、模拟移动床的应用 267 参考文献 267 第八章 分离纯化的组合应用 269 **节 概述 269 第二节 分离的主要流程 271 一、建立分析方法 271 二、提取材料选择 272 三、提取方法选择 272 四、分离纯化方法的探索 274 五、均一性的鉴定 274 第三节 分离技术的选择和组合 275 一、单元分离技术的选择 275 二、分离技术组合方案的选择原则 276 第四节 典型生物分子分离实例分析 277 一、蛋白质(酶)的分离纯化与鉴定 277 二、核酸的分离纯化与鉴定 288 三、多糖的分离纯化与鉴定 293 四、小分子物质的分离与鉴定 296 参考文献 301