分子生物学基础及应用技术(陶杰)

**章绪论/1 【知识目标】1 **节分子生物学研究的内容1 一、分子生物学定义1 二、分子生物学研究内容1 第二节分子生物学的发展历史2 一、分子生物学的开创时期（1820～1950年）2 二、近代分子生物学的发展时期（1950～1970年）3 三、分子生物学技术的深入发展应用时期4 第三节分子生物学的发展前景6 一、分子克隆技术的发展6 二、人类基因组计划与生物制药产业发展7 【课后思考】8 第二章核酸/9 【知识目标】9 【能力目标】9 **节DNA复制9 一、DNA的半保留复制10 二、DNA的双向复制10 三、DNA复制的半不连续性10 四、DNA复制体系11 五、原核生物DNA复制15 六、真核生物DNA复制19 七、线粒体DNA复制24 第二节RNA的种类及其特点25 一、RNA种类25 二、RNA的功能特点26 第三节DNA的损伤（突变）与修复27 一、基本概念27 二、突变的意义27 三、引发突变的因素28 四、基因突变的分子机制30 五、DNA损伤的修复34 六、核酸含量检测36 【课后思考】37 第三章基因转录/38 【知识目标】38 【能力目标】38 **节基因38 一、基因的概念38 二、基因的结构39 三、原核生物基因组43 四、真核生物基因组46 五、病毒基因组49 第二节真核细胞的转录50 一、RNA聚合酶51 二、转录过程51 三、转录产物的加工52 第三节原核细胞的转录57 一、RNA聚合酶57 二、转录单位58 三、转录过程58 四、转录产物的加工59 【课后思考】60 第四章蛋白质合成与基因表达调控/64 【知识目标】64 【能力目标】64 **节蛋白质生物合成的主要物质64 一、信使RNA（ mRNA——翻译的模板）和遗传密码65 二、转运RNA（tRNA）68 三、氨基酰tRNA合成酶（AAtRNA合成酶）70 四、核糖体与蛋白质合成场所71 第二节原核生物蛋白质合成73 一、蛋白质生物合成的基本原理73 二、原核生物蛋白质合成过程73 三、多核糖体80 四、原核生物蛋白质合成的抑制剂81 第三节真核生物蛋白质合成82 一、真核生物蛋白质合成的特点82 二、真核生物蛋白质合成过程83 三、真核生物蛋白质合成的特异抑制剂86 第四节生物合成蛋白质运输及加工修饰过程87 一、蛋白质运输87 二、蛋白质的加工和修饰90 第五节基因表达调控95 一、真核生物基因表达调控95 二、原核生物基因表达调控98 【课后思考】101 第五章分子生物学常用技术及应用/103 【知识目标】103 【能力目标】103 **节PCR技术103 一、PCR定义103 二、PCR基本原理104 三、实现PCR的基本条件104 四、PCR技术的扩展110 五、PCR技术的应用113 第二节基因工程技术116 一、基因工程技术原理116 二、基因工程药物127 三、基因工程技术开发药物的一般过程127 四、基因工程药物制造实例——重组人干扰素生产工艺128 第三节基因诊断技术131 一、基因诊断的概念和特点132 二、基因诊断技术及理论基础133 三、基因诊断技术在临床上的应用145 第四节反义核酸技术147 一、RNA干扰技术148 二、反义寡核苷酸150 第五节基因敲除技术150 一、基本原理150 二、基因敲除技术的操作程序151 三、基因敲除技术的应用151 第六节分子生物学技术在其他领域的应用152 一、基因改造物种（动物、植物、微生物）及其转基因生物食品152 二、神奇基因工程分析技术153 三、分子生物学与环境保护154 【课后思考】155 第六章分子生物实验技术/157 【知识目标】157 【能力目标】157 **节生物安全实验室常识157 一、生物安全实验室的设施和设备要求158 二、实验室生物安全防护159 第二节生物安全实验室的特性及安全防护措施159 一、生物安全实验室的特性159 二、生物实验室事故的历史与现状160 三、生物实验室安全防护措施160 第三节危害实验室安全的因素和应对方案161 一、自然灾害161 二、设备故障162 三、人为因素163 第四节分子生物学实验综合规程与实验操作166 实验一仪器设备简介、操作、实验规范训练及实验准备167 实验二植物基因组DNA的提取173 实验三DNA的琼脂糖凝胶电泳175 实验四植物总RNA的提取176 实验五聚合酶链反应基因扩增179 实验六聚丙烯酰胺凝胶电泳（PCR差异显示片段的回收）180 实验七LB培养基的配制182 实验八Ecoli感受态细胞的制备184 实验九目的产物的T载体的连接与转化185 实验十阳性克隆的筛选及序列测定结果分析186 参考文献/187