包邮生物化学实验指导(第二版)(中国轻工业“十四五”规划教材/国家级一流本科课程配套

第1部分　生物化学实验室基础知识 一、生物化学实验基本要求 (一) 实验记录 (二) 实验报告 (三) 实验报告评分标准 二、实验室基本操作 (一) 玻璃仪器的洗涤与清洁 (二) 塑料器皿的清洗 (三) 清洗液的原理与配制方法 (四) 量器类的使用方法 (五) 过滤方法 (六) 试管及离心管中液体的混匀操作 三、几种常规仪器设备的使用 (一) 分光光度计 (二) 电子天平 (三) 干燥箱和恒温箱 (四) 恒温水浴锅(槽) (五) 离心机 第二部分　生物化学技术原理 一、生物大分子的制备及鉴定 (一) 盐析技术 (二) 透析和超滤 (三) 减压浓缩和冷冻干燥 二、层析技术 (一) 吸附层析 (二) 分配层析 (三) 离子交换层析 (四) 凝胶过滤层析 (五) 亲和层析 (六) 疏水作用层析 三、电泳技术 (一) 基本原理 (二) 影响泳动率的因素 (三) 电泳技术的种类 四、聚合酶链式反应（PCR）技术 (一) PCR 原理 (二) 常规PCR 反应体系与反应参数 (三) 反转录PCR (四) 荧光定量PCR 第三部分　生物化学实验 一、基础实验 实验一　苯酚-硫酸法测定水溶性多糖 实验二　氨基酸纸上层析 实验三　糖的硅胶G 薄层层析 实验四　磷脂的分离与鉴定——薄层层析法 实验五　甲醛滴定法定量测定氨基酸 实验六　蛋白质的两性反应和等电点的测定 实验七　蛋白质浓度测定 实验八　微量凯氏定氮法测总蛋白 实验九　核酸定量测定 实验十　维生素C 定量测定——2,6二氯酚靛酚滴定法 实验十一　高效液相色谱法测定果蔬中的维生素C 含量 实验十二　气相色谱法测定大豆油中脂肪酸成分 二、综合性实验 实验十三　蔗糖酶的提取及初提纯 实验十四　蔗糖酶的纯化——离子交换层析法 实验十五　蔗糖酶活力的测定 实验十六　蔗糖酶蛋白质含量测定及比活力计算 实验十七　SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的相对分子质量 实验十八　蔗糖酶的固定化及活力测定 三、选择性实验 实验十九　底物浓度对酶促反应速度的影响——米氏常数的测定 实验二十　酶的特异性、温度及pH 对酶活力的影响 实验二十一　大豆总异黄酮的提取及含量测定 实验二十二　类胡萝卜素的色层分析及鉴定 实验二十三　组织DNA 的提取及定量测定 实验二十四　DNA 的琼脂糖凝胶电泳 实验二十五　纸电泳法定量分析腺苷三磷酸 实验二十六　葡聚糖凝胶层析法测定蛋白质的相对分子质量 实验二十七　酶联免疫吸附实验(ELISA) 测定乳汁中孕酮含量 实验二十八　血清蛋白质的层析分离——血清γ-球蛋白的分离纯化(分子筛层析法) 实验二十九　血清蛋白质的电泳分离——醋酸纤维素薄膜电泳 实验三十　脲酶的凝胶过滤分离纯化 实验三十一　血清蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳 实验三十二　肝糖原的提取和定量 实验三十三　蛋白质印迹分析 实验三十四　单向定量免疫电泳 实验三十五　Trizol 法提取总RNA 实验三十六　聚合酶链式反应扩增目的DNA 片段 实验三十七　两步法反转录聚合酶链式反应扩增目的DNA 片段 第四部分　结构化PBL 实验 一、结构化PBL 二、结构化PBL 实验流程及教学要求 三、实施案例：蔗糖酶的分离纯化与鉴定 四、PBL 实验报告组成与要求 附录　　 附录一　生物化学实验室规则 附录二　实验室安全及防护知识 附录三　常用数据表 参考文献