石榴皮多酚及其在慢性炎症调节中的应用

第1章绪论001 1.1石榴皮多酚的组成和生物活性003 1.1.1石榴简介003 1.1.2石榴皮多酚及其主要活性成分004 1.1.3石榴皮多酚的生物活性008 1.2炎症反应013 1.2.1炎症反应进程014 1.2.2巨噬细胞015 1.2.3TLR4与LPS017 1.2.4炎性介质和促炎细胞因子018 1.2.5NF-κB通路020 1.2.6MAPK通路022 第2章石榴皮多酚对体外炎症反应的调节作用027 2.1石榴皮多酚的组成030 2.1.1样品制备030 2.1.2多酚组成的测定方法030 2.1.3PPPs组成成分的HPLC分析031 2.2PPPs对巨噬细胞活力的影响032 2.2.1巨噬细胞与炎症反应的关系032 2.2.2细胞培养技术034 2.2.3PPPs对巨噬细胞活力的影响037 2.2.4试验分组及处理041 2.3PPPs对LPS诱导巨噬细胞ROS生成的调节作用042 2.4PPPs对促炎因子和炎性介质基因表达的调节作用044 2.4.1基因表达的测定方法045 2.4.2LPS作用时间对促炎细胞因子基因表达的影响051 2.4.3PPPs对促炎细胞因子mRNA表达量的调节作用052 2.4.4PPPs对促炎细胞因子分泌量的调节作用055 2.5PPPs对炎性介质的调节作用058 2.5.1炎性介质的测定方法058 2.5.2PPPs对炎性介质NO/PGE2分泌和iNOS/COX-2mRNA表达的影响059 2.6讨论061 2.7本章小结064 第3章石榴皮多酚调控炎症反应的分子机制067 3.1Western blot技术检测巨噬细胞总蛋白、核蛋白和胞浆蛋白070 3.1.1总蛋白的分离与测定071 3.1.2核蛋白与胞浆蛋白的分离与测定071 3.1.3SDS-PAGE凝胶的制备073 3.1.4聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）074 3.1.5转膜074 3.1.6免疫反应075 3.1.7显色075 3.2石榴皮多酚对细胞受体的调节作用076 3.2.1测定方法076 3.2.2LPS作用时间对巨噬细胞TLR4 mRNA表达的影响078 3.2.3PPPs对TLR4受体表达的调节作用078 3.3PPPs对NF-κB炎症通路的调节作用082 3.3.1测定方法083 3.3.2PPPs对NF-κB和p65基因表达及IκB磷酸化的调节作用085 3.3.3PPPs对p65核转移和NF-κB炎症通路激活的调节作用089 3.3.4PPPs对IκBα泛素化降解的调节作用092 3.4PPPs对MAPK炎症通路的调节作用095 3.4.1测定方法095 3.4.2PPPs对MAPK通路的调节作用096 3.4.3PPPs对iNOS和COX-2蛋白表达的调节作用099 3.5讨论101 3.6本章小结106 第4章石榴皮多酚对代谢综合征的调节作用107 4.1动物实验110 4.1.1实验动物及饲料110 4.1.2实验动物的分组及处理111 4.2PPPs对MS大鼠的调节作用113 4.2.1实验方法113 4.2.2PPPs对MS大鼠体重和摄食量的影响114 4.2.3PPPs对MS大鼠血脂的调节作用115 4.2.4PPPs对MS大鼠血糖、转氨酶和FFA的调节作用116 4.2.5PPPs对MS大鼠血清CRP的调节作用118 4.3PPPs对MS大鼠肝脏的保护作用119 4.3.1PPPs对MS大鼠肝脂和肝重指数的调节作用119 4.3.2PPPs对MS大鼠肝脏MPO的调节作用120 4.3.3PPPs对MS大鼠肝脏外观的改变121 4.3.4PPPs对MS大鼠肝脏病理学的改变122 4.4PPPs对MS大鼠慢性炎症的调节作用124 4.4.1实验方法124 4.4.2PPPs对MS大鼠炎性介质的调节作用126 4.4.3PPPs对MS大鼠促炎细胞因子的调节作用128 4.4.4PPPs对MS大鼠肝脏中炎性介质和促炎细胞因子的基因表达的调节作用132 4.5PPPs对MS大鼠炎症调节的分子通路135 4.5.1实验方法135 4.5.2PPPs对MS大鼠NF-κB通路的调节作用136 4.5.3PPPs对MS大鼠MAPK通路的调节作用138 4.6讨论140 4.7本章小结143 第5章结论145 5.1本研究结论147 5.2本研究的主要创新点148 5.3本研究的不足及展望149 参考文献150 附录缩写词中英文对照表165