植物组织培养技术

　　《植物组织培养技术》：　　1．试管苗的驯化　　（1）试管苗的生长环境及特点。由于试管苗生长在培养室内的容器中，与外界环境隔离，形成了一个独特的生态系统。试管苗的生长环境与外界环境相比，具有以下四大差异：①恒温。在试管苗整个生长过程中，常需采用恒温培养，即使某一阶段稍有变动，温差也较小。而外界环境中的温度由太阳辐射量决定，处于不断变化之中，温差较大。②高湿。培养容器内的相对湿度接近于100%，远远大于容器外的空气湿度，所以试管苗的蒸腾量极小。③弱光。培养室内采取人工补光，其光照强度远不及太阳光强，故幼苗生长也一般较小，不能经受太阳光的直接照射。④无菌。试管苗所在环境是无菌的。不仅培养基无菌，而且试管苗也无菌。在移栽过程中试管苗要经历由无菌向有菌的转换。　　在特殊生态环境中生长的试管苗，具有以下几个特点：①试管苗生长细弱，茎、叶表面角质层不发达；②试管苗茎、叶虽呈绿色，但叶绿体的光合作用较差；③试管苗的叶片气孔数目少，活性差；④试管苗根的吸收功能弱。因此，试管苗基本上处于异养状态，自身光合能力很弱，依靠培养基为其生长提供营养物质。　　（2）试管苗的驯化。由于试管苗的生长环境与外界环境差异很大，在移栽前必须要经过驯化或称为炼苗的过程，以逐渐提高试管苗对外界环境条件的适应性，提高其光合作用的能力，从异养向自养转变，促使试管苗健壮生长，*终达到提高试管苗移栽成活率的目的。驯化应从温度、湿度、光照及有无菌等环境要素进行，其方法是：将装有试管苗的培养容器移到温室或大棚，先不打开瓶盖或封口膜，并不能立即接收太阳光的直接照射，以免瓶内升温太快，使幼苗因蒸腾作用过强失水萎蔫，甚至死亡。可以先进行适当遮蔽，再逐渐拆除保护，让试管苗接收自然散射光照射，并逐步适应自然的昼夜温差变化。3～5d后打开瓶盖或封口膜，使试管苗生长更接近外界环境条件，再炼苗2～3d后即可移栽。试管苗驯化成功的标准是茎长粗、叶增绿、根系延长并由黄白色变为黄褐色。　　2．试管苗的移栽　　（1）基质准备。移栽基质要求疏松、透水、通气，有一定的保水性，易消毒处理，不利于杂菌滋生。常选用的基质主要有：①蛭石。是由黑云母风化而成的次生物，通过高温处理使其疏松多孔，质地轻，能吸收大量的水，保水、持肥、吸热、保温能力较强，易于消毒。②珍珠岩。是一种火山喷发的酸性熔岩，经急剧冷却而成的玻璃质岩石，因其具有珍珠裂隙结构而得名。由于在1000～1300℃高温条件下其体积迅速膨胀4～30倍，故质地轻，持水、吸热、保温性强，且无菌。③河沙。其颗粒直径为1～2mm的粗沙，排水性强，但保水蓄肥能力差。④草炭土。是由沉积在沼泽中的植物残骸经过长时间的腐烂后形成的，其保水性好，蓄肥能力强，呈中性或微酸性。⑤腐殖土。是由植物落叶等经腐烂形成的，营养丰富，含有大量的矿质营养及有机物质。其他基质材料还有炉灰渣、谷壳、锯木屑等。基质使用时应按一定的比例搭配，常用的有珍珠岩：蛭石：草炭土为1：1：0.5，或河沙：草炭土为1：1。应根据不同植物的栽培习性来合理搭配基质，才能获得满意的移栽效果。　　（2）移栽方法。试管苗移栽方法有：①常规移栽。将驯化后的小苗取出，用清水洗去附着于根部的琼脂培养基，操作时应尽量减少对根系和叶片的损伤。用50%多菌灵800倍溶液浸泡消毒1～2min，然后移栽到混合基质中。栽植深度适宜，不可埋没叶片。移栽后要浇1次透水，但不能造成基质积水而使根系腐烂。保持一定的温度和水分，适当遮阳。当长出2～3片新叶时，即可将其移栽到田间或盆钵中。这种移栽方法适合草莓、百合、非洲菊、马铃薯等多数植物。②直接移栽。直接将试管苗移栽到盆钵中。这种方法适合于具有专业化生产的温室条件，如风梨、万年青、花叶芋、绿巨人等盆栽植物的规模化生产，选用适宜的盆栽基质，直接将生根试管苗移栽入盆，随着植株的年长，再逐渐换大型号的花盆。③嫁接。有些木本植物不易在试管内生根，可选取适合的实生幼苗作砧木，用试管苗作接穗进行嫁接。嫁接移栽法与常规移栽法相比具有移栽成活率高、适用范围广、成苗所需的时间短、有利于移栽植株的生长发育等许多优点。　　（3）移栽后的管理。移栽后的养护管理也是一个非常关键的环节，主要应注意以下几个方面：①控制温度。对花叶万年青、巴西铁树、变叶木等喜温植物，以25℃左右为宜；文竹、吞石竹、满天星、非洲菊、菊花等喜温植物，以18～20℃为宜。温度过高会导致幼苗蒸腾作用加强，水分失衡以及菌类滋生等问题；温度过低使幼苗生长迟缓或不易成活。如果能有良好的设备或配合适宜的季节，使温度略高于空气温度2～3℃，则有利于生根和促进根系发育，提高成活率。　　……