基因工程学原理(第4版)/马建岗/西安交通大学本科十三五规划教材

第1章 绪论 1.1 基因与基因工程 1.1.1 基因的概念 1.1.2 基因工程的诞生与发展 1.1.3 基因工程的研究内容 1.1.4 基因工程与生物工程的关系 1.2 基因工程的操作和应用 1.2.1 基因工程的操作流程 1.2.2 基因工程的应用 1.3 基因工程的安全性 1.3.1 基因工程的安全隐患 1.3.2 重组DNA研究的安全措施 1.3.3 转基因产品的消费安全性 1.4 本教材的结构安排第2章 基因工程的工具酶 2.1 限制性核酸内切酶 2.1.1 宿主的限制和修饰现象 2.1.2 限制性核酸内切酶的类型 2.1.3 限制性核酸内切酶的命名 2.1.4 影响限制性核酸内切酶活性的因素 2.1.5 限制性核酸内切酶对DNA的消化作用 2.1.6 限制性核酸内切酶反应的终止 2.2 DNA修饰酶 2.2.1 核酸酶 2.2.2 聚合酶 2.2.3 修饰DNA分子末端的酶 2.3 DNA连接酶 2.3.1 大肠杆菌和T4噬菌体的DNA连接酶 2.3.2 影响连接反应的因素第3章 目的基因 3.1 基因的组织 3.1.1 原核生物基因的结构 3.1.2 真核生物基因的结构 3.2 从基因文库中筛选目的基因 3.2.1 基因组文库的构建 3.2.2 cDNA文库的构建 3.3 化学法合成目的基因 3.3.1 磷酸二酯法 3.3.2 亚磷酸三酯法 3.3.3 寡核苷酸的连接 3.4 通过PCR获得目的基因 3.4.1 PCR技术 3.4.2 聚合酶链式反应的*适条件 3.4.3 聚合酶链式反应技术的应用第4章 基因的体外重组 4.1 基因克隆策略 4.2 克隆载体 4.2.1 质粒载体 4.2.2 噬菌体载体 4.2.3 柯斯质粒载体 4.2.4 人工染色体载体 4.3 DNA的连接 4.3.1 DNA片段在体内和体外的连接——黏性末端的连接 4.3.2 F齐末端的连接 4.3.3 TA克隆第5章 基因的转移与重组体的检测 5.1 基因克隆的宿主细胞 5.2 重组体向宿主细胞的导人 5.2.1 重组体DNA分子的转化或转染 5.2.2 入DNA的体外包装 5.2.3 体外包装的入噬菌体的转导 5.3 重组体克隆的筛选与鉴定 5.3.1 遗传检测法 5.3.2 物理检测法 5.3.3 核酸杂交筛选法 5.3.4 免疫化学检测法 5.3.5 DNA一蛋白质筛选法第6章 原核细胞的基因工程 6.1 原核表达的宿主细胞 6.2 影响原核细胞基因表达的因素 6.2.1 原核生物基因表达的特点 6.2.2 原核基因表达的调控序列 6.2.3 原核表达载体 6.2.4 提高克隆基因表达效率的途径 6.3 利用原核细胞生产人胰岛素和生长激素 6.3.1 生产重组蛋白的表达系统 6.3.2 重组人胰岛素的生产 6.3.3 重组人和牛生长激素的生产 6.4 利用原核细胞生产小分子抗体第7章 酵母细胞的基因工程 7.1 酵母染色体的人工合成 7.2 酵母基因的克隆 7.2.1 酵母基因克隆载体——穿梭质粒 7.2.2 利用大肠杆菌突变互补法克隆酵母生物合成基因 7.2.3 用简单的互补法克隆酵母基因 7.3 以酵母细胞为材料对真核生物功能的研究 7.3.1 酵母的同源重组 7.3.2 用酵母研究高等生物基因的信号通路 7.3.3 用酵母研究真核细胞核内小分子.RNA U2的功能 7.3.4 用酵母研究真核细胞蛋白质一蛋白质相互作用 7.4 利用酵母细胞生产乙肝疫苗第8章 哺乳动物细胞的基因工程 8.1 哺乳动物细胞的基因转移 8.1.1 哺乳动物细胞的选择性标记 8.1.2 哺乳动物细胞基因转移的途径 8.2 转基因哺乳动物细胞基因的表达 8.2.1 基因的瞬时表达 8.2.2 基因的长期稳定表达 8.2.3 基因的高效表达 8.3 用哺乳动物细胞大规模生产人的复杂蛋白质第9章 转基因植物 9.1 植株再生 9.1.1 植物在遗传工程方面的优缺点 9.1.2 原生质体再生植株 9.1.3 叶盘再生植株 9.2 植物基因转移的途径 9.2.1 土壤农癌杆菌的Ti质粒引起冠瘿瘤 9.2.2 Ti质粒的T-DNA部分转移至植物细胞 9.2.3 T-DNA经过改造后作为基因工程载体 9.2.4 植物基因转移的方式 9.2.5 用报告基因证明转移基因在植物组织中的表达 9.2.6 病毒作为植物基因转移的载体 9.2.7 用基因枪和电击法将DNA转移入植物细胞 9.2.8 用DNA包裹的粒子轰击可产生转基因细胞器 9.3 转基因植物基因的表达 9.3.1 植物表达抗感染的病毒外壳蛋白 9.3.2 植物表达微生物毒素以阻止昆虫蚕食 9.3.3 抗除草剂植物 9.3.4 转基因花卉植物 9.3.5 利用转基因植物生产有重要价值的蛋白质 9.4 转基因植物生产基因代谢产物 9.4.1 “黄金大米”的基因工程生产 9.4.2 PHB的基因工程生产第10章 转基因动物 10.1 转基因小鼠 10.1.1 转基因小鼠的微注射途径 10.1.2 转基