普通植物病理学实验指导

验证性实验部分 实验一 植物病原物一般形态及病害症状观察 植物侵染性病害的病原物主要有菌物、细菌、病毒、线虫、寄生性植物等。植物病原菌物是真核生物，典型的营养体为菌丝，根据隔膜的有无可分为无隔菌丝和有隔菌丝。菌丝在培养基上通常形成圆形、毛绒状的菌落。植物病原细菌为单细胞原核生物，其基本形态多为杆状，个体小，需要在油镜下（1000倍）才能观察，繁殖方式一般是裂殖，在固体培养基上可形成各种不同形状、质地和颜色的菌落。植物病毒是一类非细胞形态的细胞内寄生物，主要由核酸和蛋白质组成，有杆状、球状、丝状等类型，只能通过电子显微镜才能观测。植物病原线虫为小型低等无脊椎动物，多为雌雄同形，为不分节的乳白色透明线形体；少数为雌雄异形，雄虫线状，雌虫洋梨形或球形。寄生性植物是指因缺乏叶绿素不能营光合作用或某些器官退化而成为异养的寄生性植物。 植物受病原物侵染后，经过一系列的病理程序，*后表现为植物外部可见的症状。一种病害的症状特征往往具有稳定性和特异性，这是诊断植物病害的基础。植物病害症状可区别为两类不同性质的特征：病状和病征。植物病害症状标本常被制作成蜡叶标本或液浸标本进行保存，但常因在制作或保存过程中其颜色或质地发生改变，症状可能会失去一些特征性，如病征脱落不明显或病状颜色失去原色，在观察这类标本时要注意辨别。实验前*好采集一些典型症状的新鲜标本进行观察。 一、目的要求 通过实验观察，初步识别植物病原菌物、细菌、病毒、线虫和寄生性植物的基本形态或繁殖体特性；初步掌握不同类型病原在植物上所表现出病害症状异同点；结合植物病害标本症状观察，初步学习描述和记载植物病害症状，加强对植物病害有个感性认识，为今后学习植物病害的诊断奠定基础。 二、材料与用具 （一）材料 植物病原菌物和病原细菌的平板培养物，植物线虫的分离物，新鲜的植物病害标本，各种类型植物病害的腊叶或液浸标本、植物病原物的玻片标本。 （二）用具 体视镜、显微镜、解剖挑针、载玻片、盖玻片。 三、实验内容和方法 （一）植物病原物的基本形态观察 1.植物病原菌物菌落及营养体 （1）菌落观察观察 平板培养基上腐霉菌（Pythium sp.）和镰刀菌（Fusarium sp.）的菌落特征，注意菌落大小、形状、质地、颜色等形态特点。 （2）菌落营养体观 察用解剖挑针挑取上述2种菌物的丝状物于载玻片上的水滴中，盖上盖玻片，制成临时玻片，在光学显微镜下观察。注意观察菌丝的形状，分隔的有无等。 2.植物病原细菌菌落 观察平板培养的水稻白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae pv. oryzae）、白菜软腐病菌（Pectobacterium carotovora subsp. carotovora）菌落特征。注意菌落大小、形状、质地、颜色等形态特点。 3.植物病毒的形态特征 观察烟草花叶病毒（tobacco mosaic virus，TMV）、黄瓜花叶病毒（cucumber mosaic virus，CMV）、马铃薯Y病毒（potato virus Y，PVY）电镜照片，注意观察病毒粒体形状、大小。 4.植物病原线虫的形态特征 体视镜下观察培养皿中活的水稻潜根线虫（Hirschmanniella oryzae）虫态，显微镜下观察玻片中水稻潜根线虫（包括雌虫、雄虫）标本。 5.寄生性植物的形态特征 观察菟丝子（Cuscuta sp.）、桑寄生（Loranthus sp.）的蜡叶标本；观察寄生藻（Cephaleuros sp.）的新鲜标本。注意观察寄生性种子植物叶片有无与寄主植物接触寄生等情况。 （二）植物病害的症状观察 1.病状类型 植物病害的症状类型主要可分为变色、坏死、腐烂、萎蔫和畸形等5大类。 （1）变色变色大多发生在叶片，由于叶绿素的形成受阻或破坏而发生不同程度的褪绿或其他色素的出现而导致色泽的改变。果实、种子和花瓣也会有各种变色。变色的主要类型有以下几种。 彩图请扫码 褪绿或黄化：整个叶片或者叶片的一部分均匀地变色，褪绿是由于叶绿素的减少而使叶片表现为浅绿色。当叶绿素的量减少到一定程度就表现为黄化。观察植物缺素症（图1.1）；小麦黄矮病等病害标本。 花叶与斑驳：叶片不是均匀地变色。花叶是由于形状不规则的深绿、浅绿、黄绿或黄色部分相间而形成不规则的杂色，不同变色部分的轮廓是很清楚的。如果变色部分的轮廓不很清楚，这种症状就称作斑驳。观察烟草普通花叶病（图1.2）、菜豆花叶病等病害标本。 图1.1 柑橘缺硼与缺镁 图1.2 烟草普通花叶病 （2）坏死坏死是植物局部细胞和组织的死亡引起的一种常见病状，常随病原和发病部位而表现不同程度的坏死。主要种类有以下几种。 彩图请扫码 斑点：病部局部组织或细胞坏死，产生各种形状、大小和颜色不同的斑点，如条斑、圆斑、角斑。观察玉米小斑病、稻瘟病、水稻细菌性条斑病（图1.3）、枇杷角斑病（图1.4）、烟草环斑病等标本。 枯死：病部局部或大部分组织发生变色、焦枯、死亡。观察马铃薯晚疫病、水稻白叶枯病（图1.5）等标本。 图1.3 水稻细菌性条斑病 图1.4 枇杷角斑病 图1.5 水稻白叶枯病 彩图请扫码 穿孔、落叶和落果：在病斑外围的组织形成离层，使病斑从健康组织中脱落下来，形成穿孔；有些植物的花、叶、果等受害后，在叶柄或果柄附近产生离层而引起过早的落叶、落果等。观察桃细菌性穿孔病（图1.6）标本。 图1.6 桃细菌性穿孔病 彩图请扫码 疮痂：果实、嫩茎、块茎等病组织局部木栓化，表面粗糙，病部凸起。观察柚疮痂病（图1.7）、花生疮痂病（图1.8）等标本。 图1.7 柚疮痂病 图1.8 花生疮痂病 彩图请扫码 溃疡：病部深入到皮层，组织坏死或腐烂，病部面积较大，稍凹陷，周围的寄主细胞有时增生或木栓化，多见于木本植物的枝干上的溃疡症状。观察柑橘溃疡病（图1.9）、苹果腐烂病、番茄溃疡病等标本。 猝倒和立枯：大多发生在植物的苗期，幼苗的茎基或根冠坏死，地上部萎蔫以致死亡。观察瓜苗猝倒病、红麻立枯病（图1.10）等标本。 图1.9 柑橘溃疡病 图1.10 红麻立枯病