水曲柳组织培养技术

目录1　绪论　11.1　水曲柳生物学特性　11.2　水曲柳的经济和生态价值　11.3　水曲柳繁殖和组织培养研究进展　21.3.1　水曲柳播种、扦插和嫁接繁殖现状　21.3.2　水曲柳组织培养研究现状　21.4　水曲柳组织培养研究存在的问题和发展前景　31.4.1　不同繁殖材料的繁殖潜力有差异　31.4.2　同种繁殖材料体胚发生潜力差异的分子机制尚不清楚　41.4.3　组培苗再生率和存活率低　41.4.4　水曲柳组织培养研究的发展前景　42　水曲柳种子无菌发芽与胚轴离体再生　62.1　水曲柳种子采集与处理　62.2　器械的洗涤和灭菌　72.3　培养基配制　72.4　培养步骤与培养条件　72.5　水曲柳种子无菌发芽与下胚轴离体再生　82.5.1　水曲柳种子无菌发芽　82.5.2　水曲柳下胚轴的离体再生　92.6　结论　183　水曲柳不定芽发生和腋芽增殖途径的植株再生　203.1　材料采集　203.2　外植体消毒与切割　203.3　培养基配制　213.4　培养步骤与培养条件　223.5　水曲柳不定芽发生培养结果　223.5.1　外植体类型对不定芽发生的影响　223.5.2　细胞分裂素对下胚轴不定芽发生的影响　233.5.3　生长素对下胚轴不定芽发生的影响　233.6　水曲柳腋芽增殖培养结果　243.6.1　外植体类型对腋芽增殖的影响　243.6.2　培养基类型对腋芽增殖的影响　243.6.3　6-BA浓度对腋芽增殖的影响　243.6.4　NAA浓度对腋芽增殖的影响　253.7　水曲柳微枝生根培养结果　253.8　炼苗和移栽　263.9　结论　274　水曲柳离体根培养体系的建立　284.1　水曲柳离体根培养的材料与方法　284.1.1　水曲柳实生苗根尖　284.1.2　水曲柳无菌苗根尖　284.2　水曲柳离体根培养的结果与分析　294.2.1　水曲柳实生苗离体根培养的影响因素　294.2.2　水曲柳无菌苗胚根离体培养的影响因素　304.2.3　水曲柳无菌苗根尖离体培养的影响因素　324.2.4　水曲柳无菌苗根尖愈伤组织诱导的影响因素　374.3　结论　405　水曲柳合子胚子叶愈伤组织诱导和增殖的影响因素　425.1　水曲柳愈伤组织诱导和增殖的材料与方法　435.1.1　材料预处理　435.1.2　预培养方法　435.1.3　愈伤组织诱导培养方法　435.1.4　愈伤组织增殖培养方法　435.2　水曲柳愈伤组织诱导和增殖的结果与分析　445.2.1　水曲柳愈伤组织诱导材料预培养　445.2.2　植物生长调节剂对愈伤组织诱导的影响　455.2.3　基因型对愈伤组织增殖的影响　465.2.4　植物生长调节剂对愈伤组织增殖的影响　475.3　结论　486　水曲柳体胚发生和植株再生　506.1　水曲柳体胚发生的材料与方法　506.1.1　实验材料　506.1.2　实验方法　516.1.3　组织细胞学观察方法　526.1.4　体胚萌发培养方法　526.1.5　体胚苗移栽和驯化方法　526.2　水曲柳体胚发生与植株再生的结果与分析　526.2.1　种子采集时间对水曲柳体胚发生的影响　526.2.2　基本培养基对水曲柳体胚发生的影响　536.2.3　植物生长调节剂对水曲柳体胚发生的影响　546.2.4　蔗糖对水曲柳体胚发生的影响　556.2.5　水曲柳体胚发生的细胞组织学观察　566.2.6　水曲柳体胚萌发与转苗　576.2.7　水曲柳体胚苗移栽和驯化　586.3　结论　587　水曲柳合子胚与体胚发生的细胞学观察　597.1　材料与方法　597.1.1　实验材料　597.1.2　水曲柳合子胚发生的细胞学观察方法　597.1.3　水曲柳体胚的诱导方法　607.1.4　水曲柳体胚发生的细胞学观察方法　607.2　结果与分析　607.2.1　合子胚发生的细胞学观察　607.2.2　体胚发生的细胞学观察　627.3　结论　638　外植体母树来源对水曲柳体胚发生的影响　648.1　材料与方法　648.1.1　材料采集与处理　648.1.2　水曲柳体胚发生培养方法　658.1.3　继代培养与增殖培养方法　658.2　结果与分析　658.2.1　不同采种母树未成熟合子胚子叶外植体的体胚发生潜力比较　658.2.2　激素组合对未成熟合子胚子叶外植体体胚发生的影响　668.2.3　母树来源对未成熟合子胚子叶愈伤组织诱导的影响　688.2.4　激素组合对未成熟合子胚子叶愈伤组织诱导的影响　708.2.5　激素组合与母树来源对未成熟合子胚子叶外植体体胚发生的交互作用　728.2.6　不同地区母树来源成熟合子胚体胚发生　738.2.7　同一地区不同母树来源成熟合子胚体胚发生　748.2.8　不同母树成熟合子胚体胚发生　768.2.9　水曲柳成熟合子胚与未成熟合子胚子叶外植体的体胚发生效果比较　788.3　结论　799　外植体取材时期对水曲柳体胚发生的影响　809.1　材料与方法　809.1.1　材料　809.1.2　主要试剂　819.1.3　方法　819.1.4　外植体培养步骤　829.2　结果与分析　839.2.1　未成熟合子胚的体胚诱导培养　839.2.2　成熟合子胚的体胚发生培养　889.2.3　体胚的成熟培养　899.2.4　体胚的萌发培养　899.2.5　体胚苗的生根　909.2.6　炼苗和移栽　919.3　结论　9110　水曲柳体胚发生的同步化调控　9210.1　材料与方法　9310.1.1　材料采集与处理　9310.1.2　培养基配制与培养条件　9310.1.3　同步化调控方法　9310.1.4　数据统计分析方法　9410.2　结果与分析　9410.2.1　渗透压对水曲柳体胚发生同步化的影响　9510.2.2　低温对水曲柳体胚同步化发生的影响　9910.2.3　脱落酸对水曲柳体胚同步化的影响　10210.2.4　不同处理对水曲柳子叶胚同步化发生和畸形胚发生的调控效果比较　10410.2.5　水曲柳体胚的萌发与生根　10610.3　结论　11011　抗褐化剂对水曲柳子叶外植体褐化及体胚发生的影响　11111.1　材料与方法　11111.1.1　研究材料与体胚诱导　11111.1.2　抗褐化剂处理　11211.2　结果与分析　11211.2.1　PVP、L-Glu和AgNO3对水曲柳成熟合子胚子叶外植体褐化及体胚发生的影响　11211.2.2　抗坏血酸对水曲柳成熟合子胚子叶外植体体胚发生的影响　11511.2.3　抗坏血酸对水曲柳成熟合子胚子叶外植体褐化的影响　11611.3　结论　11712　抗褐化剂对水曲柳体胚发生过程中外植体生理生化的影响　11812.1　材料与方法　11812.1.1　研究材料和体胚诱导　11812.1.2　抗褐化剂处理　11912.2　PVP、L-Glu和AgNO3对水曲柳外植体生理生化的影响　11912.2.1　PVP、L-Glu和AgNO3对外植体多酚含量和PPO活性的影响　11912.2.2　PVP、L-Glu和AgNO3对外植体抗氧化酶SOD和POD活性的影响　12012.2.3　PVP、L-Glu和AgNO3对外植体MDA含量的影响　12112.3　外源　ASA对水曲柳外植体生理生化的影响　12112.3.1　外源　ASA对外植体多酚含量和PPO活性的影响　12112.3.2　外源　ASA对外植体PAL活性的影响　12212.3.3　外源　ASA对外植体ASA合成代谢的影响　12212.3.4　外源　ASA对外植体APX活性的影响　12512.3.5　外源　ASA对外植体细胞内活性氧代谢的影响　12512.3.6　外源　ASA对外植体细胞内MDA含量的影响　12712.3.7　外源　ASA对外植体细胞内NO合成的影响　12712.4　结论　12813　水曲柳体胚发生伴随外植体褐化的生理机制及差异蛋白　12913.1　材料与方法　12913.1.1　材料采集与体胚诱导　12913.1.2　蛋白样品制备　13013.1.3　蛋白质的分离　13013.2　结果与分析　13213.2.1　蛋白质的分离　13213.2.2　实际等电点与分子质量分析　13313.2.3　不同样品蛋白点表达比较分析　13513.2.4　蛋白点质谱鉴定结果　13713.3　结论　14314　不同取材时期水曲柳合子胚DNA甲基化及体胚发生状态　14414.1　材料与方法　14514.1.1　不同取材时期水曲柳合子胚子叶诱导体胚发生　14514.1.2　不同取材时期水曲柳合子胚子叶基因组DNA甲基化　14614.2　结果与分析　15214.2.1　不同取材时期水曲柳合子胚体胚发生状态　15214.2.2　不同取材时期水曲柳合子胚　DNA甲基化　15714.3　结论　16315　水曲柳体胚成熟及萌发促进研究　16415.1　材料与方法　16415.1.1　水曲柳直接体胚发生中的体胚成熟培养　16415.1.2　水曲柳间接体胚发生中的愈伤组织分化培养　16515.1.3　水曲柳间接体胚发生中的体胚成熟培养　16515.1.4　水曲柳体胚萌发生根培养　16515.1.5　水曲柳植株移栽成苗　16515.2　结果与分析　16615.2.1　水曲柳直接体胚发生中的体胚成熟培养　16615.2.2　水曲柳间接体胚发生中的愈伤组织分化培养　17315.2.3　水曲柳间接体胚发生中的体胚成熟培养　17515.2.4　适宜水曲柳萌发培养的材料　17715.2.5　继代次数与水曲柳体胚萌发培养的关系　17815.2.6　继代次数与水曲柳体胚生根培养的关系　17815.2.7　外源添加物质对水曲柳体胚生根的影响　17915.2.8　水曲柳植株移栽成苗　18015.3　结论　18016　结论与研究展望　18216.1　主要结论　18216.2　研究展望　185参考文献　187