临床分子生物学检验技术实验指导

**部分　分子生物学检验技术实验室
一、分子生物学检验技术实验须知
二、分子生物学检验技术实验室介绍
三、分子生物学检验技术常用仪器介绍
四、分子生物学实验室生物安全

第二部分　核酸的分离与纯化
实验1　真核基因组dna的分离与纯化
实验2　真核细胞mrna的分离与纯化
实验3　质粒dna的提取
实验4　核酸的鉴定

第三部分　核酸扩增技术
实验5　聚合酶链反应
实验6　pcr-rf1p检测线粒体dnaa3243g异质性突变
实验7　等位基因特异性扩增法检测结核分枝杆菌rpob基因突变
实验8　trap一银染法检测端粒酶活性
实验9　多重pcr检测测a-地中海贫血基因缺失
实验10　pcr—sscp检测苯丙酮尿症苯丙氨酸羟化酶基因外显子7突变
实验11　实时荧光定量pcr检测乙型肝炎病毒（hbv）核酸
实验12　逆转录．聚合酶链反应检测甘油醛-3-磷酸脱氢酶mrna

第四部分　核酸分子杂交技术
实验13　探针的制备
实验14 dna分子杂交
实验15 rna分子杂交
实验16　荧光原位杂交
实验17　反向斑点杂交法检测b-地中海贫血

第五部分　分子克隆技术
实验18　dna的限制性内切酶酶切反应
实验19  目的片段的连接
实验20　感受态细胞的制备及重组子转化
实验21　重组子的鉴定

第六部分　其他分子检验技术
实验22　真核细胞基因转染技术
实验23　western印迹
实验24　双向聚丙烯酰胺凝胶电泳
实验25　h1a基因分型
实验26　乙型肝炎病毒基因分型(芯片法)
实验27 pcr-荧光探针法检测cyp2c19基因多态性

第七部分　创新性实验、设计性实验及综合性实验
实验28　采用导流杂交基因芯片技术进行人乳头瘤病毒基因分型
实验29　采用多重连接依赖探针扩增技术检测抗肌萎缩蛋白基因突变
实验30　人肝癌相关microrna一21的定量检测
实验31  荧光素酶报告基因的制备
实验32　基因重组

附录　分子生物学检验技术实验中常用试剂和缓冲液的配制