精编分子生物学实验技术

**章 PCR技术
**节 RT-PCR
第二节 实时定量PCR

第二章 RNA干扰技术
第三章 MicroRNA研究方法

第四章 长链非编码RNA研究方法
**节 长链非编码RNA概述
第二节 RNA pull-down鉴定RNA-蛋白质相互结合
第三节 RNA免疫共沉淀技术

第五章 CRISPR/Cas9基因编辑技术
**节 SgRNA的设计及打靶效应分析
第二节 受精卵注射CRISPR/Cas9系统制备基因编辑动物

第六章 重组DNA技术
**节 大肠杆菌感受态细胞的制备
第二节 质粒DNA的转化
第三节 质粒提取
第四节 琼脂糖凝胶电泳检测DNA
第五节 凝胶回收DNA
第六节 重组DNA的构建
第七节 病毒载体介导的重组DNA技术
复制缺陷型腺病毒载体的包装
慢病毒载体的包装
第八节 目的蛋白的原核表达与分离纯化
目的蛋白的原核诱导表达
目的蛋白的表达检测
菌体的细胞破碎
镍离子亲和层析纯化
DEAE阴离子交换层析
凝胶过滤层析

第七章 Western-blot技术
**节 蛋白样品制备
第二节 蛋白定量
第三节 SDS-PAGE电泳
第四节 电转移
第五节 酶免疫定位

第八章 蛋白相互作用筛选及验证
**节 酵母双杂交系统筛选
第二节 免疫共沉淀
第三节 Pull-down实验

第九章 蛋白泛素化检测

第十章 转录调控机制研究
**节 转录因子与靶基因相关性分析
第二节 靶基因的启动子克隆
第三节 报告基因活性分析
第四节 DNA-转录因子结合分析
第五节 ChIP-Seq技术

第十一章 核酸甲基化分析
**节 基因组DNA提取
第二节 DNA甲基化分析
第三节 RNA甲基化分析

第十二章 基因表达谱芯片分析

第十三章 蛋白质谱分析

第十四章 细胞代谢研究方法
**节 基于Seahorse生物能量分析仪测定糖酵解和线粒体有氧代谢的方法
第二节 线粒体呼吸链复合体功能的测定

第十五章 相关细胞学技术
**节 细胞冻存
第二节 细胞复苏
第三节 细胞计数法测定生长曲线
第四节 MTT法测定细胞增殖
第五节 CCK-8法测定细胞增殖
第六节 BrdU法测定细胞增殖
第七节 平板克隆形成实验
第八节 软琼脂克隆形成实验
第九节 Transwell
第十节 划痕实验
第十一节 细胞周期的测定
第十二节 细胞凋亡检测
第十三节 脂质体介导的质粒转染
第十四节 病毒感染

第十六章 相关组织学技术
**节 动物组织取材和固定
第二节 临床标本收集方法
第三节 免疫组织（细胞）化学
第四节 间接免疫荧光
第五节 原位杂交技术

第十七章 相关常用动物实验
**节 裸鼠移植瘤动物模型
第二节 小动物活体成像技术

第十八章 分子生物学常用数据库
**节 基因基本信息的获取
第二节 基因表达调控分析
第三节 基因功能分析

第十九章 计算机模拟辅助小分子药物设计
**节 基于药效团模型的虚拟筛选方法
第二节 基于分子对接的虚拟筛选
第三节 骨架迁越

第二十章 常用实验设计和统计方法
**节 完全随机设计分组
第二节 样本量估计软件实现
第三节 实验原始数据记录及预处理
第四节 统计分析方法的选择
第五节 学术论文设计方法描述