口蹄疫及其转基因植物疫苗

前言 上篇 概述 1 口蹄疫病毒基因组基本结构及其分子生物学特征 1.1 口蹄疫概述 1.2 口蹄疫流行概况 1.3 口蹄疫病毒分类及结构 1.4 口蹄疫病毒基因组基本结构 1.5 口蹄疫病毒结构蛋白主要功能 1.6 口蹄疫病毒非结构蛋白主要功能 1.7 阿克苏（Akesu/O/58）口蹄疫病毒基因组结构及特点 参考文献 2 口蹄疫疫苗研究进展 2.1 口蹄疫传统疫苗 2.1.1 FMD弱毒疫苗 2.1.2 FMD灭活疫苗 2.2 口蹄疫新型疫苗 2.2.1 FMD基因工程亚单位疫苗 2.2.2 FMD合成肽疫苗 2.2.3 FMD融合蛋白疫苗 2.2.4 FMD核酸疫苗 2.2.5 FMD重组活载体疫苗 2.2.6 FMD基因缺失疫苗 2.2.7 FMD反向遗传疫苗 2.3 免疫效果和水平监测 参考文献 3 植物反应器生产医用蛋白的研究进展 3.1 转基因植物生产疫苗的基本流程和表达系统 3.2 转基因植物疫苗的研究概况 3.3 转基因植物疫苗的临床应用 3.4 转基因植物抗体的研究概况 3.5 转基因植物抗体的临床应用 3.6 转基因植物药用蛋白的研究概况 3.7 生物安全性评价 3.7.1 对健康的影响 3.7.2 对环境和生态的影响 3.7.3 转基因植物的检测 参考文献 4 口蹄疫转基因植物疫苗的研究 4.1 国外研究概况 4.2 国内研究概况 4.2.1 口蹄疫病毒结构基因P1在马铃薯中的转化与表达 4.2.2 口蹄疫病毒结构基因P1在玉米中的转化与表达 4.2.3 口蹄疫病毒结构基因P1在水稻中的转化与表达 4.2.4 口蹄疫病毒结构基因VP1在热带牧草柱花草中的转化与表达 4.2.5 口蹄疫病毒结构基因在豆科植物中的转化与表达 参考文献 下篇 实验操作 5 阿克苏（Akesu/O/58）FMDV结构基因VP1和P1的克隆与核苷酸序列分析 5.1 目的 5.2 基本原理与技术路线 5.3 材料与方法 5.3.1 材料 5.3.2 方法 5.4 结果 5.4.1 目的基因的获得 5.4.2 目的基因的克隆与鉴定 5.4.3 目的基因的核苷酸和氨基酸序列 5.5 讨论 5.6 结论 参考文献 6 植物双元表达载体的构建 6.1 目的 6.2 基本原理与技术路线 6.3 材料与方法 6.3.1 材料 6.3.2 方法 6.4 结果 6.4.1 目的基因的扩增 6.4.2 中间表达载体的鉴定 6.4.3 目的基因核苷酸序列测定与分析 6.4.4 植物双元表达载体的构建和鉴定 6.5 讨论 6.6 结论 参考文献 7 根癌农杆菌介导的阿克苏（Akesu/O/58）FMD结构基因VP1在烟草中的转化与表达 7.1 目的 7.2 技术路线 7.3 材料与方法 7.3.1 材料 7.3.2 方法 7.4 结果 7.4.1 转化植株的抗性筛选和抗性植株的获得 7.4.2 目的基因和选择性报告基因的PCR检测 7.4.3 目的基因和选择性报告基因的转录水平检测 7.4.4 目的基因的DNA点杂交和PCR-Southern印迹 7.4.5 目的基因的表达 7.5 讨论 7.6 结论 参考文献 8 阿克苏（Akesu/O/58）FMDV VP1基因在两种豆科牧草中的转化与转基因植株的获得 8.1 目的 8.2 基本原理与技术路线 8.3 材料与方法 8.3.1 材料 8.3.2 方法 8.4 结果 8.4.1 组织培养观察 8.4.2 双元表达载体的鉴定 8.4.3 转化植株的筛选和抗性植株的获得 8.4.4 目的基因和选择性报告基因的PCR检测 8.4.5 目的基因和选择性报告基因的转录水平检测 8.4.6 目的基因DNA点杂交和PCR-Southern印迹 8.4.7 目的蛋白的Western Blot检测 8.5 讨论 8.6 结论 参考文献 9 FMDV VP1 转基因烟草对Balb/C小鼠免疫效果的研究 9.1 目的 9.2 技术路线 9.3 材料与方法 9.3.1 材料 9.3.2 方法 9.4 结果 9.4.1 血清抗体的检测 9.4.2 病毒的乳鼠半数致死量 9.4.3 病毒血症试验 9.4.4 攻毒保护率 9.5 讨论 9.6 结论 参考文献 10 口蹄疫转基因植物疫苗研究总结与展望 10.1 口蹄疫转基因植物疫苗研究总结 10.1.1 目的基因的选择 10.1.2 转化受体植物的选择 10.1.3 转基因方法的选择 10.1.4 口蹄疫转基因植物疫苗免疫效果 10.2 展望 10.2.1 获得高效稳定表达的转化植株 10.2.2 提高外源基因转化率与检测灵敏度 10.2.3 提高转基因植物疫苗的免疫效果 参考文献 符号或缩略语说明 附录