医学科研信息分析与实验技能

**篇　文献检索与选题篇
**章　文献检索/ 2
第 1节　中文文献检索 /2
第 2节　PubMed文献检索 /13
第 3节　Web of Science文献检索 /18
第二章　知云文献翻译软件使用/ 27
第三章　医学科研选题/ 31
第二篇　实验技术篇
**章　核酸提取和定量/ 34
第 1节　真核细胞基因组DNA提取 /34
第 2节　真核细胞总RNA提取 /37
第 3节　凝胶中DNA的回收 /41
第 4节　质粒DNA小量提取 /42
第 5节　碱裂解法提取质粒详解 /44
第 6节　质粒DNA大量提取（碱裂解法） /46
第二章　核酸体外扩增/ 48
第 1节　PCR引物设计和特异性验证 /48
第 2节　OligoCalc引物分析 /57
第 3节　基础PCR /59
第 4节　高GC含量PCR体系 /64
第 5节　逆转录PCR /65
第 6节　miRNA PCR扩增 /67
第 7节　实时定量PCR /70
第 8节　巢式PCR /73
第 9节　降落PCR /75
第三章　核酸分离纯化和分析/ 78
第 1节　琼脂糖凝胶电泳 /78
第 2节　琼脂糖凝胶中DNA染色检测 /80
第 3节　聚丙烯酰胺凝胶电泳及DNA检测 /83
第 4节　核酸纯化 /86
第 5节　单链构象多态性分析 /91
第四章　质粒载体克隆和转化/ 94
第 1节　重组质粒构建 /94
第 2节　大肠埃希菌感受态细胞制备 /96
第 3节　质粒转化大肠埃希菌及菌落PCR鉴定 /97
第五章　序列分析/ 100
第 1节　桑格-库森法测序 /100
第 2节　TA克隆法测序 /104
第 3节　Chromas序列查阅 /110
第六章　真核细胞中导入基因/ 113
第 1节　磷酸钙法转染真核细胞 /113
第 2节　聚乙烯亚胺协助转染 /115
第七章　蛋白质提取和定量/ 118
第 1节　细胞蛋白质提取 /118
第 2节　蛋白质定量 /120
第 3节　C12多肿瘤标志物联合检测 /122
第八章　蛋白质相关分析/ 125
第 1节　蛋白质印迹法 /125
第 2节　蛋白质印迹法常用试剂配制 /130
第 3节　免疫沉淀法和免疫共沉淀法 /138
第 4节　免疫荧光技术 /140
第 5节　酶联免疫吸附测定 /142
第九章　DNA-蛋白质相互作用 /146
第 1节　电泳迁移率变动分析 /146
第 2节　染色质免疫沉淀法 /150
第 3节　双荧光素酶报告基因实验 /154
第十章　细菌接种、培养和鉴定 /157
第 1节　手卫生（七步洗手法） /157
第 2节　细菌培养基制备 /158
第 3节　细菌冻存和复苏 /160
第 4节　细菌接种技术 /161
第 5节　细菌涂片制作 /163
第 6节　细菌革兰氏染色 /164
第十一章　细胞培养/ 166
第 1节　细胞冻存与复苏 /166
第 2节　原代细胞培养 /168
第 3节　脐带血内皮克隆形成细胞培养 /169
第 4节　细胞传代 /171
第 5节　悬浮细胞培养 /172
第 6节　海拉细胞培养 /174
第 7节　细胞培养中微生物污染控制 /175
第十二章　细胞活力检测/ 178
第 1节　噻唑蓝比色实验 /178
第 2节　流式细胞术 /179
第 3节　细胞划痕实验 /181
第 4节　细胞迁移和侵袭实验（Transwell法） /182
第 5节　细胞黏附实验 /185
第十三章　组织病理技术/ 187
第 1节　组织取材和固定 /187
第 2节　组织病理制片 /189
第 3节　组织切片苏木精-伊红染色和 Masson三色染色 /191
第 4节　病理切片封片 /193
第 5节　免疫组织化学技术 /196
第 6节　荧光原位杂交 /200
第 7节　原位杂交（地高辛法） /203
第 8节　4% 多聚甲醛配制方法 /206
第十四章　常用动物实验技术/ 209
第 1节　常用实验动物抓取和固定 /209
第 2节　常用实验动物性别鉴定 /210
第 3节　常用实验动物标记方法 /211
第 4节　小鼠饲养和繁殖 /213
第 5节　鼠尾基因组DNA快速提取 /215
第 6节　试剂盒提取动物组织基因组DNA /217
第 7节　基因工程小鼠基因型鉴定 /219
第 8节　大、小鼠眼眶后静脉丛采血 /221
第 9节　家兔心脏采血 /222
第 10节　大、小鼠灌胃方法 /223
第 11节　大鼠皮下注射 /224
第 12节　大、小鼠腹腔注射 /225
第 13节　小鼠尾静脉注射 /226
第 14节　家兔灌胃方法 /228
第 15节　家兔肌内注射 /229
第 16节　家兔静脉注射 /230
第 17节　小鼠心脏灌流固定 /231
第 18节　小鼠安乐死法 /232
第三篇　实验仪器使用篇
**章　消毒和灭菌技术仪器/ 236
第 1节　独立通气笼盒系统 /236
第 2节　高压蒸汽灭菌器 /237
第 3节　脉动真空灭菌器 /240
第 4节　细菌过滤器 /241
第二章　离心分离技术仪器/ 243
第 1节　小型高速低温离心机 /243
第 2节　中型冷冻高速离心机 /244
第 3节　多管架自动平衡离心机 /245
第三章　定量技术仪器/ 248
第 1节　电子分析天平 /248
第 2节　紫外透射仪 /249
第 3节　分光光度计 /250
第 4节　核酸蛋白检测仪 /252
第 5节　EnVision多功能酶标仪 /253
第 6节　流式细胞仪 /255
第 7节　LC-10A 高效液相色谱仪 /258
第 8节　API 4000液质联用仪 /261
第四章　电泳技术仪器/ 266
第 1节　电泳仪 /266