海洋贝类免疫学实验技术

前言
**章 海洋贝类实验材料、免疫刺激和样本收集
**节 扇贝的暂养、饲喂、免疫刺激及样品采集方法
第二节 牡蛎的暂养、饲喂、免疫刺激及样品采集方法
第二章 基于核酸的实验方法
**节 基于蛋白酶K法的海洋贝类基因组DNA制备
第二节 基于Trizol类试剂的海洋贝类总RNA提取
第三节 核酸的琼脂糖凝胶电泳
第四节 用于qPCR和RACE的cDNA合成及加尾反应
第五节 常规PCR技术和RACE技术
第六节 基于SYBR Green的实时荧光定量PCR技术
参考文献
第三章 基于蛋白质的实验方法
**节 原核重组表达系统的选择
第二节 重组质粒的构建
第三节 基于IPTG的原核表达
第四节 GST标签蛋白纯化
第五节 His标签蛋白的□性纯化（镍琼脂糖凝胶FF柱）
第六节 His标签蛋白非□性纯化
第七节 MBP标签蛋白纯化
第八节 SDS-聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳
第九节 蛋白质的透析复性
第十节 基于BCA法的蛋白浓度测定
第十一节 基于Bradford法的蛋白浓度测定
第十二节 小鼠多克隆抗体制备
第十三节 免疫印迹法
第十四节 凝胶迁移实验
参考文献
第四章 免疫组化相关实验方法
**节 血淋巴细胞滴片及组织石蜡切片的制备
第二节 基于血淋巴细胞滴片及组织石蜡切片的免疫荧光技术
第三节 扇贝和牡蛎胚胎整体免疫荧光
参考文献
第五章 免疫活性相关实验方法
**节 □□□□活性测定
第二节 凝菌活性测定及其抑制实验
第三节 凝血活性测定
第四节 细胞包囊化活性测定
第五节 基于ELISA的PAMPs结合活性测定
第六节 RNA干扰技术
参考文献
第六章 免疫指标相关实验方法
**节 基于FITC荧光法测定细胞吞噬活性
第二节 细胞凋亡水平检测
第三节 新生循环血细胞数目检测
第四节 一氧化氮合成酶活性测定
第五节 总一氧化氮含量测定
第六节 酚氧化酶活性测定
参考文献
第七章 基于细胞的相关实验方法
**节 基于Leiboviz's L-15培养基的贝类原代细胞培养
第二节 哺乳动物细胞传代培养
第三节 哺乳动物细胞瞬时转染
第四节 报告基因表达实验
第五节 基于DAPI/Hochest 33258的细胞核染色
第六节 基于DiI的细胞膜染色
参考文献