生物化学实验与技术

目 录
**篇 生物化学实验技术原理
**章 电泳技术1
**节概述1
第二节电泳的基本原理2
第三节区带电泳技术7
第四节染色方法26
第二章 层析技术31
**节概述31
第二节层析技术的基本理论33
第三节层析定性与定量分析41
第四节常用的层析方法44
第三章 分光光度法57
**节概述57
第二节光吸收的基本规律60
第三节分光光度计的构造和类型61
第四节定性、定量方法及其应用64
第五节双波长分光光度计及其测定方法66
第四章 超离心技术70
**节概述70
第二节超离心分离方法75
第三节密度梯度液的制备和区带收集79
第四节制备超离心机作沉淀分析84
第五章 生物大分子的分离纯化与鉴定85
**节生物大分子制备的前处理85
第二节分离纯化87
第三节生物大分子的浓缩、干燥和保存88
第四节生物大分子含量的测定和纯度鉴定90
第二篇 基础验证性实验
实验一 血浆蛋白质乙酸纤维薄膜电泳92
实验二 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳94
实验三 血清总蛋白的测定及标准曲线的制作（双缩脲法）95
实验四 蛋白质定量测定Folin-酚试剂法97
实验五 血清丙氨酸氨基转移酶（S-ALT）活性测定99
实验六 动物组织DNA的提取和鉴定102
实验七 肝糖原的提取鉴定与定量104
实验八 运动后血中乳酸含量的变化105
实验九 血清总胆固醇测定（磷硫铁法）108
实验十 琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制109
实验十一 氨基酸的薄层层析110
实验十二 氨基酸双向纸层析111
实验十三 凝胶层析分离血红蛋白与CuSO4114
实验十四 胡萝卜素的柱层析分离115
实验十五 血清尿素氮的测定116
实验十六 3H-胸苷掺入DNA的实验118
实验十七 32P掺入磷脂的实验119
实验十八 血红蛋白及其衍生物的吸收光谱测定121
实验十九 核酸溶液的紫外吸收测定122
实验二十 蛋白质溶液的紫外吸收测定123
实验二十一 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦分离血清蛋白质125
实验二十二 血清脂蛋白快速超离心分离实验127
实验二十三 密度梯度离心法分离肝细胞器128
实验二十四 细胞色素c的制备和含量测定130
实验二十五 固定化具有葡萄糖异构酶活性菌体的制备132
实验二十六 亲和层析法纯化胰蛋白酶133
实验二十七 胰酶的活性测定136
第三篇 综合性实验
综合性实验一 影响酶活性的因素及酶促反应速度与时间的关系138
综合性实验二 血清白蛋白、γ-球蛋白的分离纯化及鉴定146
综合性实验三 Cu Zn超氧化物歧化酶的分离、纯化及活性、稳定性测定149
综合性实验四 SDS-PAGE分离蛋白质、血清蛋白聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳154
综合性实验五 动物组织RNA的提取和鉴定160
综合性实验六 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清乳酸脱氢酶（LDH）同工酶163
第四篇 创新性实验
创新性实验一 外周血DNA的提取和鉴定168
创新性实验二 凝血酶的固定化及其稳定性测定171
创新性实验三 糖尿病的生化检测分析及胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响172
创新性实验四 DEAE纤维素离子交换层析法分离血清蛋白质175
创新性实验五 PBL教学法在《生物化学》课堂教学中的运用178
附录179
附录1 生物化学实验的基本操作及原理179
附录2 常用容量仪器的规格、使用、清洗及洗液的配制183
附录3 化学试剂的规格与保管187
附录4 实验室常用设备介绍188