猪链球菌致病分子基础与防控技术

目录序前言**章 猪链球菌病 1**节 猪链球菌病概述 1第二节 猪链球菌病原学特征及临床表现 3一、猪链球菌形态特征 3二、猪链球菌培养特征 3三、猪链球菌兰氏（Lancefiled）分群特征 4四、猪链球菌血清型特征 4五、猪链球菌病的临床表现 5第三节 猪链球菌与其他病原的混合感染 6一、猪链球菌与流行菌（毒）株混合感染现状 6二、猪链球菌与H1N1猪流感病毒混合感染的分子机制 11参考文献 15第二章 猪链球菌病的流行病学 18**节 猪链球菌病的流行病学特征 19一、血清型分型 19二、基因型分型 20第二节 猪链球菌全基因组测序与比较基因组学研究 25一、猪链球菌泛基因组学研究 25二、猪链球菌比较基因组学研究 28第三节 猪链球菌的耐药性及耐药分子特性 31一、猪链球菌耐药谱 31二、猪链球菌的耐药分子机制 34参考文献 44第三章 猪链球菌毒力基因筛选技术 46**节 毒力基因筛选 46一、体内诱导抗原技术筛选毒力基因 47二、差异蛋白质组学筛选猪链球菌致病相关基因 49第二节 鉴定黏附相关毒力因子新技术的开发 51一、ACSP技术的建立与筛选 52二、候选SIP的验证 54参考文献 57第四章 毒力相关因子的功能研究 60**节 黏附因子功能研究 60一、HP0197蛋白 61二、淀粉酶结合蛋白B（Abpb）基因 69三、M13金属多肽酶SsPepO 71四、其他黏附相关毒力因子 72第二节 免疫逃避因子相关功能研究 75一、IgA1蛋白酶 75二、IgG结合蛋白 78三、其他免疫逃避途径 80第三节 猪链球菌诱导过度炎症的分子机制 88一、猪链球菌2型促炎蛋白作用机制 89二、树突状细胞促进猪链球菌炎性风暴机制的研究 110第四节 转录调控相关因子功能研究 114一、双组分信号转导系统resS-resR 115二、双组分信号转导系统NisKR和BceRS 116三、双组分信号转导系统CiaRH 117四、双组分信号转导系统1910HK/RR 118五、转录调节因子CodY 119六、Spx调节因子 121参考文献 122第五章 炎症与免疫 125**节 宿主应答猪链球菌感染的基因筛选 126一、猪链球菌2型感染猪脾脏的转录组学研究 126二、猪链球菌2型感染宿主猪的转录组学研究 128第二节 TREM-1在猪链球菌2型感染中的作用及机制研究 131一、TREM-1在猪链球菌2型感染中的作用及其应答机制的研究 131二、鼠TREM-1相互作用蛋白的筛选和鉴定研究 135三、Actin激活TREM-1信号通路的研究 137第三节 S.suis诱导中性粒细胞胞外诱捕网形成和逃避杀菌效应及其机制的研究 139一、NETs在S.suis感染中的功能研究 139二、S.suis逃避NETs杀菌效应的机制研究 141三、S.suis诱导NETs形成机制的初步研究 144第四节 表皮生长因子受体在猪链球菌2 型致脑膜炎过程中的作用及机制研究 147参考文献 155第六章 猪链球菌分子靶标的鉴定 158**节 猪链球菌2型免疫原性蛋白的筛选和鉴定 158一、免疫蛋白质组学简介 158二、猪链球菌免疫原性蛋白鉴定 159三、免疫原性蛋白的表面定位 162四、免疫原性蛋白的体内表达 162第二节 应用比较蛋白质组学鉴定体内诱导抗原 162一、体内诱导抗原的鉴定 162二、体内诱导抗原表达的验证 163第三节 利用反向疫苗学发掘保护性抗原 164一、反向疫苗学研究策略 164二、反向疫苗学方法鉴定抗原保护效力 165第四节 保护性抗原的特性分析 167一、保护性抗原HP0197特性分析 167二、保护性抗原HP1036特性分析 167三、保护性抗原Enolase特性分析 168四、保护性抗原HP0272特性分析 168五、细胞膜相关蛋白SSU0434特性分析 168六、细胞膜相关蛋白SSU0482特性分析 168七、细胞膜相关蛋白SSU1853特性分析 169八、细菌保守性抗原6-磷酸葡萄糖脱氢酶（6PGD）的特性分析 170九、保护性抗原提供高效保护效力的机制分析 170参考文献 171第七章 猪链球菌病诊断新技术 172**节 猪链球菌2型抗体胶体金检测方法 172一、荚膜多糖抗原的制备 172二、胶体金的制备与试纸条组装 173三、胶体金试纸条效果的检测 174第二节 猪链球菌PCR检测方法 176一、PCR扩增条件的优化 176二、PCR检测方法敏感性与可靠性的验证 178第三节 猪链球菌2型分泌核酸酶A（SsnA）的鉴别诊断方法 180一、SsnA重组蛋白的表达纯化 181二、SsnA蛋白ELISA方法的初步建立 182第四节 猪链球菌2型基因缺失疫苗ΔGlnA/ECE1开发及其鉴别诊断分子标识的研制 183第五节 猪链球菌2型ELISA抗体检测试剂盒 185一、荚膜多糖抗原的制备及检测 185二、ELISA反应条件的摸索 185三、试剂盒其他试剂的制备及半成品检验 188参考文献 190第八章 猪链球菌病新型疫苗及免疫预防 191**节 猪链球菌病三价灭活疫苗 191一、生产用菌株的选择和确定及菌种的毒力标准 192二、菌种的保存及使用代次 198三、疫苗的安全检验 201四、疫苗免疫效力研究 201五、疫苗的保存期 203第二节 猪链球菌病-副猪嗜血杆菌病二联亚单位疫苗 204一、生产用抗原的选择和确定 205二、菌种的毒力标准 207三、制备疫苗菌种的保存及使用代次 208四、疫苗的安全检验 208五、疫苗免疫效力研究 209六、疫苗的保存期 214第三节 猪链球菌2型弱毒活疫苗 215一、猪链球菌弱毒疫苗菌株的筛选 215二、猪链球菌2型生物学特性鉴定 217三、猪链球菌弱毒菌株毒力返强试验研究 222四、猪链球菌病活疫苗安全性试验 227五、猪链球菌病活疫苗产品的保存期试验 228第四节 猪链球菌-猪霍乱沙门氏菌三联基因工程疫苗研究 229一、重组菌株的构建与鉴定 229二、重组菌株免疫小鼠的攻毒保护效力试验 232参考文献 235附录 236附录1 发表论文目录 236附录2 获得专利及奖励 242一、主要科技奖励 242二、其他主要奖励和荣誉 242三、获得新兽药注册证书3项，并实现产业化 242四、获授权国家专利12项，其中发明专利10项 242附录3 术语表 244