紫花苜蓿抗寒转基因研究

1 引言 1.1 苜蓿概况 1.2 苜蓿属牧草**外育种研究进展 1.3 苜蓿属牧草基因工程研究进展 1.3.1 紫花苜蓿基因工程研究进展 1.3.2 黄花苜蓿基因工程研究进展 1.3.3 转基因苜蓿安全性问题 1.3.4 转基因苜蓿发展趋势和应用前景 1.4 CBF基因研究进展 1.4.1 CBF基因简介 1.4.2 CBF基因结构关系 1.4.3 CBF基因的表达 1.4.4 CBF基因作用机理 1.4.5 **CBF基因的研究与应用 1.4.6 国外CBF转录因子的研究与应用 1.4.7 CBF转录因子的应用前景 1.5 研究目的及意义 1.6 研究内容及技术流程 2 紫花苜蓿高效组培再生体系建立 2.1 材料 2.1.1 供试植物材料 2.1.2 培养基 2.2 方法 2.2.1 无菌苗培养 2.2.2 外植体制备 2.2.3 愈伤组织的诱导 2.2.4 愈伤组织的继代 2.2.5 愈伤组织的分化 2.2.6 生根培养 2.2.7 评价指标 2.3 结果与分析 2.3.1 愈伤组织诱导培养基的选择 2.3.2 继代培养基的选择 2.3.3 分化培养基的选择 2.3.4 外植体的选择 2.3.5 基因型的选择 2.3.6 苜蓿转化植株的生根培养 2.4 小结 2.5 讨论 2.5.1 基因型对愈伤组织分化的影响 2.5.2 外植体对愈伤组织分化的影响 2.5.3 AgNO3对胚性愈伤率的影响 2.5.4 TDZ对胚性愈伤率的影响 2.5.5 KT对愈伤组织分化的影响 3 拟南芥CBF1和CBF4基因克隆及植物表达载体构建 3.1 材料 3.1.1 拟南芥简介 3.1.2 拟南芥作为一种模式植物的优点 3.1.3 大肠杆菌 3.1.4 酶以及试剂