生物工程专业实验指导/李加友

**章生物工程实验室管理和要求1

**节实验室管理总则1

第二节实验室人员行为规范2

第三节实验设备及耗材管理3

第四节实验室药品管理4

第五节微生物实验室菌种管理制度5

第六节实验室安全卫生管理6



第二章生物化学实验8

实验一氨基酸纸色谱8

实验二蛋白质浓度测定(凯氏定氮法)11

实验三福林-酚试剂法测定蛋白质的浓度15

实验四酵母RNA的提取及组分鉴定18

实验五醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质20

实验六酶促反应的影响因素23

实验七碱法提取质粒DNA26

实验八VC含量测定——2,6-二氯酚靛酚滴定法29

实验九过氧化氢酶米氏常数(Km)的测定31



第三章微生物学实验34

实验十普通光学显微镜的使用及微生物形态观察34

实验十一细菌的革兰氏染色38

实验十二放线菌、霉菌的形态观察41

实验十三微生物大小测定和显微计数43

实验十四培养基的配制47

实验十五微生物的平板分离技术50

实验十六环境因素对微生物生长的影响53

实验十七水中细菌总数的测定56

实验十八酸奶的制作59

实验十九空气中微生物数量测定61

实验二十微生物的诱发突变63

实验二十一微生物的生理生化反应65



第四章分子生物学与基因工程实验68

实验二十二细菌基因组DNA的提取68

实验二十三动物基因组DNA的提取70

实验二十四植物基因组DNA的提取72

实验二十五PCR扩增目的DNA74

实验二十六DNA分子的酶切反应77

实验二十七感受态细胞的制备79

实验二十八重组子的构建81

实验二十九质粒的转化与鉴定83

实验三十外源基因的表达检测85



第五章发酵工程实验87

实验三十一菌种的制备与保藏87

实验三十二酵母菌的发酵过程控制89

实验三十三活性干酵母的制备94

实验三十四酵母固定化技术97

实验三十五灵菌红素的发酵制备98



第六章分离工程实验100

实验三十六灵菌红素的分离纯化与结构鉴定100

实验三十七Ni-NTA金属螯合法纯化重组β-葡萄糖苷酶103

实验三十八酵母蔗糖酶的提取与分离纯化106



参考文献110