果树生物技术

前言
**章 果树基因工程
**节 目的基因分离与克隆
一、TAIL-PCR技术
二、cDNA-AFLP技术
三、开放的差异基因表达技术
四、电子克隆技术
五、基因芯片技术
六、图位克隆技术
七、转座子标签技术
第二节 目的基因转化
一、根癌农杆菌Ti质粒介导的转化系统
二、Ri质粒介导的转化系统
三、体内电穿孔法转基因技术
四、化学物质诱导法
五、基因枪法
六、植物病毒载体介导的转染系统
七、花粉管通道法
八、脂质体法
九、显微注射法
第三节 目的基因检测
一、RT-PCR检测法
二、Southern杂交检测法
三、SDS-PAGE检测法
四、Western印迹检测法
五、EISA检测法
六、双向电泳检测法
七、荧光原位杂交检测法
第四节 果树基因工程的应用及面临的主要问题
一、果树基因工程的应用
二、果树基因工程面临的主要问题

第二章 果树细胞工程
**节 果树细胞培养和次生代谢物的生产
一、果树单细胞培养
二、果树植物愈伤组织的诱导和培养
三、果树体细胞胚的诱导培养
四、果树细胞悬浮培养
五、果树细胞培养生产次生代谢产物
第二节 果树细胞原生质体制备与融合
一、果树原生质体研究概况
二、果树原生质体分离培养技术
三、果树原生质体培养展望
第三节 果树细胞诱变研究与利用
一、果树细胞诱变的种类
二、果树细胞诱变的优势
三、果树细胞诱变的应用
第四节 果树人工种子的研制
一、人工种子的概念、构成和优势
二、人工种子的制备
三、人工种子在果树上的应用
四、果树人工种子存在问题
第五节 果树单倍体的诱发与利用
一、果树单倍体的产生途径
二、果树单倍体的鉴定方法
三、果树单倍体的加倍
四、果树单倍体和加倍单倍体技术在果树育种中的作用
五、果树单倍体和加倍单倍体技术存在的问题及发展趋势

第三章 微生物在果树生产上的应用
**节 微生物肥料在果树生产上的应用
一、微生物肥料在国内外的应用情况
二、微生物肥料的种类
三、微生物肥料的优势
四、果树生产上常用的微生物肥料
五、微生物肥料在果树生产上的应用效果
六、微生物肥料施用方法和注意事项
七、微生物肥料在果树生产上的应用前景与存在的问题
八、微生物肥料在我国的发展趋势
第二节 微生物农药在果树生产上的应用
一、微生物农药的分类
二、微生物农药的优势
三、微生物农药存在的问题
四、微生物农药的发展趋势
五、微生物农药的菌种类群
六、微生物农药的剂型
七、微生物农药的施用方法
八、果树生产上常用的微生物农药

第四章 DNA分子标记技术及其在果树上的应用
**节 DNA分子标记概述
一、遗传标记的发展历史与现状
二、遗传标记与DNA分子标记
三、DNA分子标记的特点
第二节 DNA分子标记技术的类型与种类
一、随机扩增多态性DNA
二、任意引物PCR和DNA扩增指纹
三、限制性片段长度多态性
四、扩增片段长度多态性
五、序列特征化扩增区域标记技术
六、序列标志位点技术
七、简单序列重复标记技术
八、简单重复序列区间标记技术
九、表达序列标签标记技术
十、PCR-单链构象多态性标记技术
十一、抗病基因同源序列多态性标记技术
十二、相关序列扩增多态性标记技术
第三节 DNA分子标记技术在果树上的应用
一、遗传连锁图谱的构建与基因定位
二、构建DNA指纹图谱
三、分子标记辅助选择育种
四、寻找新的基因
五、研究基因表达的差异
六、特殊种质的鉴定

第五章 PCR技术及其在果树上的应用
**节 PCR技术原理、反应体系及反应程序
一、PCR技术原理
二、PCR反应体系
三、PCR反应程序
第二节 PCR技术常见问题与处理
一、PCR扩增参数对扩增目的基因的影响
二、PCR常见问题及处理
第三节 PCR技术的种类
一、RT-PCR
二、一步RT-PCR
三、差异显示PCR
四、限制性显示PCR
五、消减PCR
六、简并PCR
七、免疫PCR
八、PCR-ELISA
九、不对称PCR
十、反向PCR
十一、多重PCR
十二、着色互补PCR
十三、巢式PCR
十四、原位PCR
十五、定量PCR
十六、PCR-Genescan
十七、快速PCR
十八、纳米金辅助PCR
第四节 PCR技术的应用
一、PCR技术用于基因克隆
二、PCR技术用于基因和基因型的鉴定
三、PCR技术用于病原物鉴定
四、PCR技术用于性别鉴定
五、PCR技术用于基因表达

第六章 RNA干扰技术及其应用
**节 RNA干扰的发现
第二节 RNA干扰的机理
第三节 RNA干扰的生物学意义及其应用
一、用于基因功能的研究与分析
二、用于抗病工作的研究
三、用于生长发育的研究与分析
四、问题与展望

第七章 基因编辑技术及其应用
一、基因编辑技术概述
二、CRISPR/Cas系统基本结构特征
三、CRISPR/Cas系统工作机理
四、CRISPR/Cas系统类型
五、CRISPR/Cas系统在植物中的研究与运用
六、CRISPR/Cas系统存在的问题与改进方法
七、CRISPR/Cas系统展望
参考文献