生物化学实验

**章生物化学实验的基本要求/001
**节实验的准确性/001
一、系统误差/001
二、偶然误差/002
三、过失错误/002
第二节实验记录及报告/002
一、实验记录/003
二、实验报告/003
第三节实验样品的制备/004
一、动物脏器/004
二、微生物/004
三、细胞/004

第二章常见的实验方法及基本原理/006
**节透析/006
第二节沉淀/007
一、蛋白质的特性/007
二、常用的蛋白质沉淀方法/008
第三节色谱/010
一、色谱原理/010
二、几种常见的色谱法/011
第四节电泳/017
一、电泳法的基本原理/018
二、几种常用电泳法简介/019
第五节分光光度法/021
一、基本原理/022
二、比色法/022
三、分光光度法/023
四、浊度法/024
第六节离心/024
第七节现代生化新方法/026
一、荧光分光光度法/026
二、旋光色散与圆二色性法/031
三、核磁共振波谱法/034
四、红外光谱法/040
五、动态光散射法/042
六、透射电镜法/044
七、原子力显微镜法/045
八、石英微晶天平/047

第三章普通实验/050
实验一实验的基本操作及要求/050
一、玻璃仪器的洗涤及各种洗液的配制方法/050
二、搅拌和振荡/051
三、容量玻璃器皿的使用方法/052
四、思考题/053
实验二糖的颜色反应/054
一、莫氏实验/054
二、塞氏实验/055
三、杜氏（Tollen）试验/055
四、思考题/056
实验三3，5-二硝基水杨酸（DNS）法测定还原糖/056
一、目的/056
二、原理/056
三、实验器材/056
四、材料与试剂/057
五、操作方法/057
六、思考题/058
实验四淀粉酶对壳聚糖降解过程的测定/058
一、目的/058
二、原理/059
三、实验器材/059
四、材料与试剂/059
五、操作方法/059
六、思考题/060
实验五残余法对粗脂肪含量的测定/061
一、目的/061
二、原理/061
三、实验器材/061
四、材料与试剂/061
五、操作方法/061
六、结果与分析/062
七、注意事项/062
八、思考题/062
实验六植物叶片在衰老过程中过氧化脂质含量的变化/062
一、目的/062
二、原理/063
三、实验器材/063
四、材料与试剂/063
五、操作方法/063
六、结果计算/063
七、思考题/064
实验七氨基酸的分离鉴定——纸色谱法/064
一、目的/064
二、原理/064
三、器材/064
四、试剂/064
五、操作方法/065
六、思考题/065
实验八离子交换色谱法分离氨基酸/066
一、目的/066
二、原理/066
三、实验器材/066
四、材料与试剂/066
五、操作方法/066
六、注意事项/067
七、思考题/068
实验九蛋白质性质（一）——蛋白质及氨基酸的呈色反应/068
一、目的/068
二、呈色反应/068
三、思考题/073
实验十蛋白质性质（二）——蛋白质等电点的测定和沉淀反应/073
一、蛋白质等电点的测定/073
二、蛋白质的沉淀及变性/075
三、尿蛋白定性检验/076
四、思考题/077
实验十一蛋白质的制备——牛奶中提取酪蛋白/077
一、目的/077
二、原理/078
三、器材/078
四、材料与试剂/078
五、操作方法/078
六、思考题/079
实验十二Bradford法测定蛋白质含量/079
一、目的/079
二、原理/079
三、器材/079
四、材料与试剂/080
五、操作方法/080
六、思考题/080
实验十三紫外分光光度法测定蛋白质的含量/080
一、目的/080
二、原理/081
三、实验器材/081
四、材料与试剂/081
五、操作方法/081
六、思考题/081
实验十四ANS荧光分析法测定蛋白质的外源荧光/082
一、目的/082
二、原理/082
三、实验器材/082
四、材料与试剂/082
五、操作方法/082
六、结果与分析/083
七、注意事项/083
八、思考题/084
实验十五血清蛋白的醋酸纤维素薄膜电泳/084
一、目的/084
二、原理/084
三、器材/084
四、材料与试剂/085
五、操作方法/085
六、思考题/086
实验十六多酚氧化酶的制备、化学性质及影响酶活的各种因素/086
一、目的/086
二、原理/087
三、实验器材/087
四、材料和试剂/087
五、操作方法/088
六、思考题/089
实验十七淀粉酶活力测定/089
一、目的/089
二、原理/090
三、实验器材/090
四、材料与试剂/090
五、操作方法/090
六、结果与分析/091
七、注意事项/091
八、思考题/091
实验十八根据底物浓度和酶反应速度之间的关系求米氏常数Km/091
一、目的/091
二、原理/091
三、实验器材/093
四、材料与试剂/093
五、操作方法/093
六、思考题/095
实验十九小牛胸腺DNA的制备及熔解温度的测定/095
一、目的/095
二、原理/095
三、实验器材/096
四、材料与试剂/096
五、操作方法/096
六、结果与分析/097
七、注意事项/097
八、思考题/097
实验二十DNA的琼脂糖凝胶电泳/097
一、目的/097
二、原理/097
三、器材/098
四、材料及试剂/098
五、操作方法/098
六、思考题/099
实验二十一质粒DNA的小量制备/099
一、目的/099
二、原理/099
三、实验器材/100
四、试剂及材料/100
五、操作方法/100
六、思考题/101
实验二十二酵母RNA提取与定性和定量鉴定/101
一、目的/101
二、原理/101
三、实验器材/102
四、材料与试剂/102
五、操作方法/102
六、思考题/103
实验二十三转氨基作用/104
一、目的/104
二、原理/104
三、实验器材/104
四、材料与试剂/104
五、操作方法/105
六、思考题/106

第四章综合实验/107
实验一SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白质印迹/107
一、目的/107
二、原理/107
三、器材/108
四、材料与试剂/108
五、操作方法/109
六、思考题/112
实验二PCR扩增目的基因片段/112
一、目的/112
二、原理/112
三、器材/113
四、材料与试剂/113
五、操作方法/113
六、思考题/114
实验三质粒DNA的酶切及连接/114
一、目的/114
二、原理/114
三、实验器材/114
四、材料与试剂/115
五、操作方法/115
六、思考题/116
实验四重组DNA质粒的转化/116
一、目的/116
二、原理/116
三、器材/117
四、材料与试剂/117
五、操作方法/117
六、思考题/118
实验五枯草芽孢杆菌碱性磷酸酶的制备及酶活力的测定/118
一、目的/118
二、原理/118
三、实验器材/119
四、材料和试剂/119
五、操作方法/119
六、思考题/121
实验六鸡卵黏蛋白的制备及活力的测定/121
一、目的/121
二、原理/121
三、实验器材/122
四、材料和试剂/122
五、操作方法/122
六、思考题/125

附录/126
一、实验室规则和安全防护/126
二、常用仪器的使用/128
三、缓冲溶液/136
四、常用的硫酸铵饱和度计算表/140
五、色谱法常用数据及性质/141
六、分子生物学及基因工程常用试剂及数据/145
七、一些常用单位/153

参考文献/155