生物分离与纯化技术(第三版)

模块一　分离与纯化单元操作技术



**单元　绪论/2



1.1生物分离与纯化技术概述/2



1.2生物分离与纯化技术的基本知识/4



1.3生物分离与纯化技术的发展历史和发展趋势/6



1.3.1生物分离与纯化技术的发展历史/6



1.3.2生物分离与纯化技术的发展趋势/6



同步训练/7



第二单元　预处理及固液分离技术/9



2.1预处理技术/9



2.1.1发酵液过滤特性的改变/10



2.1.2发酵液的相对纯化/12



2.2固液分离技术/14



2.2.1过滤技术/14



2.2.2离心技术/16



2.3典型案例/20



同步训练/22



第三单元　细胞破碎技术/23



3.1细胞壁的组成与结构/24



3.1.1微生物细胞壁的化学组成和结构/24



3.2常用的细胞破碎方法/26



3.2.1机械法/26



3.2.2非机械法/29



3.3细胞破碎效果评价与方法选择/31



3.3.1细胞破碎效果的评价/31



3.3.2各种细胞破碎方法的选择依据/32



3.4基因工程包含体的纯化方法/33



3.4.1包含体的形成/34



3.4.2包含体的纯化方法/34



3.5细胞破碎技术的发展方向/35



3.6典型案例/36



同步训练/37





第四单元　萃取技术/39



4.1概述/39



4.1.1萃取的概念/39



4.1.2萃取的分类/40



4.1.3萃取的特点/40



4.2溶剂萃取技术/41



4.2.1溶剂萃取原理/41



4.2.2溶剂萃取流程/42



4.2.3溶剂萃取影响因素/43



4.2.4萃取剂的选择/44



4.3固液浸取技术/44



4.3.1固液浸取的概念/44



4.3.2固液浸取的原理/44



4.3.3固液浸取过程的影响因素/45



4.3.4固液浸取的方法/46



4.4双水相萃取技术/46



4.4.1双水相萃取的原理和特点/46



4.4.2双水相萃取工艺流程/48



4.4.3影响双水相萃取的因素/49



4.4.4双水相萃取的应用/50



4.5超临界流体萃取技术/50



4.5.1超临界流体萃取的原理/51



4.5.2超临界流体萃取的工艺流程/52



4.5.3超临界流体萃取技术的应用/53



4.6反胶团萃取技术/55



4.6.1反胶团及其形成/55



4.6.2反胶团萃取原理/55



4.6.3影响反胶团萃取的因素/56



4.6.4反胶团萃取流程/57



4.6.5反胶团萃取蛋白质的应用/57



4.7典型案例/57



同步训练/61





第五单元　　固相析出分离技术/62



5.1盐析法/63



5.1.1盐析法的基本原理/63



5.1.2盐析用盐的种类/64



5.1.3盐析操作方法/66



5.1.4盐析注意事项/69



5.1.5影响盐析效果的因素/69



5.2有机溶剂沉淀法/70



5.2.1有机溶剂沉淀法的基本原理/71



5.2.2有机溶剂的选择/71



5.2.3有机溶剂沉淀的操作方法/74



5.2.4影响有机溶剂沉淀效果的因素/74



5.3其他沉淀法/76



5.3.1等电点沉淀法/76



5.3.2水溶性非离子型聚合物沉淀法/77



5.3.3成盐沉淀法/78



5.4结晶技术/79



5.4.1晶体的概念/79



5.4.2结晶的过程/79



5.4.3影响结晶析出的主要条件/83



5.5典型案例/84



同步训练/87



第六单元　色谱分离技术/90



6.1吸附色谱/93



6.1.1基本原理/93



6.1.2吸附色谱技术分类/93



6.1.3影响吸附分离的因素/93



6.1.4吸附剂、展层剂及洗脱剂/94



6.1.5柱吸附色谱分离基本操作/95



6.1.6吸附色谱的应用/96



6.2分配色谱/97



6.2.1基本原理/97



6.2.2载体的选择/97



6.2.3固定相与流动相的选择/97



6.2.4分配色谱的应用/98



6.3离子交换色谱/98



6.3.1基本原理/98



6.3.2离子交换介质/99



6.3.3离子交换色谱流动相的选择/105



6.3.4离子交换色谱的应用/107



6.4凝胶过滤色谱/108



6.4.1基本原理/108



6.4.2凝胶过滤色谱介质/109



6.4.3凝胶过滤色谱操作方法/112



6.4.4凝胶过滤色谱的应用/114



6.5亲和色谱/115



6.5.1基本原理/115



6.5.2亲和色谱的操作/118



6.5.3几种重要的亲和色谱/119



6.5.4亲和色谱的应用/119



6.6疏水色谱/121



6.6.1基本原理/121



6.6.2疏水色谱的应用/122



6.7高效液相色谱/123



6.7.1基本原理/123



6.7.2高效液相色谱设备配置和操作方法/125



6.7.3高效液相色谱法的应用 /126



6.8典型案例/127



同步训练/129



第七单元　膜分离技术/132



7.1膜分离过程的分类和特点/132



7.1.1膜分离过程的分类/133



7.1.2膜分离过程的特点/136



7.2膜材料与膜组件/136



7.2.1膜材料/136



7.2.2膜组件/137



7.3影响膜过滤分离效果的因素/141



7.4膜污染及其控制措施/142



7.5常见的几种膜分离技术/144



7.5.1微滤/144



7.5.2超滤/147



7.5.3纳滤/149



7.5.4反渗透/150



7.5.5电渗析/152



7.5.6其他膜分离技术/153



7.6典型案例/154



同步训练/157





第八单元　　电泳技术/159



8.1电泳技术概述/159



8.1.1电泳技术发展史/160



8.1.2电泳基本原理/160



8.1.3电泳的分类/163



8.1.4电泳装置的基本结构/164



8.2几种典型的电泳技术/165



8.2.1乙酸纤维素薄膜电泳/165



8.2.2琼脂糖凝胶电泳/167



8.2.3聚丙烯酰胺凝胶电泳/169



8.2.4双向凝胶电泳/173



8.2.5等电聚焦电泳/174



8.3典型案例/175



同步训练/177





第九单元　浓缩与干燥技术/179



9.1浓缩技术/180



9.1.1蒸发/180



9.1.2冷冻浓缩/181



9.1.3其他浓缩方法简介/182



9.2干燥技术/183



9.2.1干燥基本原理/183



9.2.2常见的干燥方法/183



9.3典型案例/185



同步训练/187





模块二　单元操作技术实训



实训1大肠杆菌的破碎及破碎率的测定/191



实训2啤酒酵母的培养及菌体的离心分离/193



实训3青霉素的萃取与萃取率的计算/195



实训4双水相萃取相图的制作/196



实训5双水相萃取分离酿酒酵母中的延胡索酸酶/198





实训6双水相萃取牛奶中酪蛋白条件的探索/201



实训7超临界二氧化碳萃取甘草黄酮/202



实训8盐析法分离小牛血清中IgG/204



实训9牛乳中酪蛋白和乳蛋白素粗品的制备/206



实训10离子交换树脂的预处理及交换容量的测定/208



实训11离子交换色谱分离氨基酸/210



实训12超滤法浓缩真菌多糖/213



实训13亲和色谱分离GST蛋白/215



实训14乳清蛋白脱盐(凝胶色谱法)/217



实训15分配色谱测定吐根中吐根碱和吐根酚碱/219



实训16Sephadex G50分离蓝色葡聚糖2000、细胞色素c

和溴酚蓝/221



实训17高效液相色谱测定葛根素含量/223



实训18聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)分离蛋白质/225



实训19蛋白质的透析/230



实训20蛋白质的真空浓缩/231



实训21酸奶粉冷冻干燥/233



实训19谷氨酸的浓缩与结晶/236



模块三　　单元集成技术实训



实训1四环素的提取(沉淀法)及含量测定/242



实训2细胞色素c粗品的制备及含量测定/246



实训3木瓜蛋白酶的分离与纯化及酶活力检测/248



实训4超氧化物歧化酶(SOD)的制备及活力测定/251



实训5从菠萝中提取菠萝蛋白酶/253



实训6甘露醇的制备及鉴定/255



实训7茶多酚的提取及含量测定/256



实训8异黄酮的提取与鉴定/258



实训9RNA的制备及纯度鉴定/263



实训10香菇多糖的提取与鉴定/265



实训11卵磷脂的提取与鉴定/267



实训12叶绿素的提取与分离/269



实训13桂花精油的提取和成分分析/271



实训14谷胱甘肽的制备及含量测定/273



实训15溶菌酶的提取与鉴定/275



实训17辅酶Q10的提取及含量测定/278



主要参考文献/281