化学生物学实验(第二版)

目录第二版序第二版前言**版前言第1章 化学生物学实验基本知识 11.1实验室规则及须知 11.2实验室安全及防护知识 11.2.1生物源的危害和防护 11.2.2放射性和紫外线辐射的危害和防护 21.2.3生物样品的存放 21.2.4生物类实验废弃物的处理 21.2.5其他的实验室安全及防护知识、实验室废弃物处理 3第2章 化学生物学实验基本操作 52.1常用仪器的洗涤 52.1.1玻璃器皿的洗涤 52.1.2其他材质器皿的洗涤 52.2常用消毒灭菌方法 62.2.1物理消毒灭菌方法 62.2.2化学消毒灭菌方法 62.3化学生物学样品的处理和纯化 72.3.1材料的选取和前处理 72.3.2细胞的破碎 72.3.3蛋白质的提取和纯化 82.3.4核酸的提取和纯化 82.3.5样品的浓缩和干燥 92.4离心技术 92.4.1离心技术的原理 92.4.2离心机的类型和转头的分类 102.4.3常用离心方法 112.4.4高速冷冻离心机 122.5常用色谱分离技术 132.5.1凝胶色谱 132.5.2离子交换色谱 142.5.3反相色谱 142.6电泳技术 142.6.1基本原理 142.6.2琼脂糖凝胶电泳 152.6.3聚丙烯酰胺凝胶电泳 152.6.4毛细管电泳 162.6.5凝胶成像技术 162.7 PCR技术 162.7.1 PCR技术简介 162.7.2 PCR技术的基本原理和过程 172.7.3 PCR的五个元素 172.7.4 PCR仪及其使用 182.8细胞培养技术 192.8.1体外培养细胞的分类 192.8.2培养细胞的生长和增殖过程 202.8.3原代细胞的培养 212.9其他仪器的使用 212.9.1移液枪 212.9.2气相色谱仪 222.9.3液相色谱仪 242.9.4红外光谱仪 242.9.5荧光分光光度计 252.9.6二氧化碳培养箱 262.9.7倒置相差显微镜 272.9.8酶标仪 292.9.9活体荧光成像系统 292.9.10激光粒度仪 302.9.11流式细胞仪 31第 3章 生化分离分析实验 32实验 1疏水作用色谱分离纯化 .-淀粉酶 32实验 2亲和色谱树脂的制备及溶菌酶的提取纯化 37实验 3青霉素酰化酶米氏常数和反应活性的测定 42实验 4静电自组装构筑 HRP多层膜电极检测酚类物质研究 46实验 5 FRET法及荧光猝灭法测定蛋白酶的活性 49第 4章 生物材料制备实验 55实验 6生物矿物和生物矿化——碳酸钙多形的控制与制备 55实验 7无定形碳酸钙的制备和转化 58实验 8聚乙烯亚胺-DNA复合物粒径和表面电荷的测定 61实验 9复凝聚法制备阿霉素微囊及其质量评价 63实验 10盐酸左氧氟沙星不同晶型的制备及其表征 66第 5章 化学中基因工程实验 70实验 11大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒 DNA的转化 70实验 12琼脂糖凝胶电泳分离 DNA片段 73实验 13 PCR基因扩增获取毛囊 DNA及其分离 75实验 14植物基因组 DNA的提取与扩增 77实验 15 PCR-RFLP法检测单核苷酸多态性 81实验 16基于连接反应的滚环扩增技术检测单核苷酸多态性 86实验 17枯草杆菌脂肪酶 A的基因克隆 89第 6章 化学中蛋白质工程实验 96实验 18 2′-脱氧尿苷衍生物的酶促合成的选择性调控 96实验 19酶催化迈克尔加成反应 98实验 20 Novozym 435催化的 1-位芳基取代的末端炔丙醇动力学拆分反应 100实验 21金属卟啉模拟的生物氧化过程 102实验 22操控式分子动力学模拟：以泛素蛋白的 3D结构研究为例 106实验 23新冠病毒受体结合域 (RBD)与受体蛋白 ACE2相互作用的分子模拟 121实验 24 Docking：以新冠病毒刺突蛋白受体结合域 (RBD)与橙皮苷分子对接为例 130第7章 化学中细胞工程实验 140实验 25 MTT法测定聚乙烯亚胺的细胞毒性 140实验 26抗肿瘤药物 5-氟尿嘧啶对肿瘤细胞的抑制及细胞形态观察 142实验 27基于荧光分子探针的细胞内活性氧水平测定 144实验 28抗肿瘤药物 5-氟尿嘧啶对肿瘤细胞迁移的影响 146实验 29聚乙烯亚胺 -DNA复合物体外细胞转染实验 148实验 30聚乙烯亚胺携带基因在细胞中的荧光染色实验 150实验 31聚乙烯亚胺作为基因载体材料携带 TRAIL基因对细胞凋亡的影响 153实验 32聚乙烯亚胺 -阿霉素复合物的细胞摄取实验 156实验 33聚乙烯亚胺 -阿霉素实体瘤原位注射成像实验 158实验 34流式细胞技术检测细胞增殖实验 159第 8章 探索性实验 162实验 35环糊精-聚乙烯亚胺聚合物的合成及携带基因药物的性质实验 162实验 36 脂肪酶 CALB的理性设计及其对仲醇立体选择性的调控 165实验 37大豆食品中转基因成分的分析 171参考文献 175附录 178附录 1常用化学生物学缓冲溶液的配制 178附录 2常用特殊化学生物学试剂的配制 179附录 3生物信息数据库 180