生化分离技术(第二版)(张爱华)

项目一发酵液的预处理

任务一微生物细胞破碎1

【知识目标】1

【技能目标】1

【**知识】1

一、细胞破碎的方法1

二、选择破碎方法的依据5

【知识拓展】 微生物的细胞壁6

【实例训练】利用机械和非机械细胞破碎法提取多酚氧化酶8

【技能拓展】细胞破碎率的测定9

任务二发酵液的预处理9

【知识目标】10

【技能目标】10

【**知识】10

一、发酵液过滤特性的改变10

二、杂质的去除12

【知识拓展】发酵液的组成13

【实例训练】维生素C发酵液的预处理14

任务三发酵液的固液分离15

【知识目标】15

【技能目标】16

【**知识】16

一、粗滤16

二、离心分离18

【知识拓展】生化分离的一般过程及单元操作23

【实例训练】蔗糖密度梯度离心法提取叶绿体26

【技能拓展】低速大容量冷冻离心机标准操作规程27

目标检测29



项目二有机物质的萃取

任务四有机溶剂萃取有机小分子物质31

【知识目标】31

【技能目标】31

【**知识】31

一、萃取的类型及原理31

二、有机溶剂萃取33

【知识拓展】35

一、反胶团萃取35

二、液膜萃取37

【实例训练】有机溶剂萃取红霉素38

【技能拓展】液固萃取40

任务五双水相萃取生物大分子物质40

【知识目标】40

【技能目标】40

【**知识】40

一、双水相萃取的基本原理40

二、双水相体系的种类41

三、双水相萃取的影响因素41

四、双水相萃取的操作42

五、双水相萃取的特点及应用43

【知识拓展】超临界萃取43

【实例训练】双水相萃取细胞色素C45

【技能拓展】双水相萃取操作中多聚物及盐的后处理46

目标检测46



项目三生物大分子的沉淀与结晶

任务六盐析法分级分离蛋白质48

【知识目标】48

【技能目标】48

【**知识】48

一、盐析法的原理49

二、中性盐的选择49

三、影响盐析的因素50

四、盐析操作过程及其注意事项50

五、盐析的应用53

【知识拓展】54

一、有机溶剂沉淀54

二、血浆蛋白55

【实例训练】硫酸铵盐析法分级分离血浆中的IgG56

任务七等电点沉淀法分离蛋白质57

【知识目标】58

【技能目标】58

【**知识】等电点沉淀58

【知识拓展】59

一、有机聚合物沉淀59

二、金属离子沉淀60

三、有机酸沉淀60

四、牛乳中的蛋白质61

【实例训练】等电点沉淀法分离牛乳中的酪蛋白62

任务八结晶法提纯蛋白质63

【知识目标】63

【技能目标】63

【**知识】63

一、结晶的过程64

二、结晶条件的选择与控制66

【知识拓展】胃液成分68

【实例训练】结晶法提纯胃蛋白酶69

【技能拓展】结晶设备71

目标检测73



项目四膜分离

任务九超滤法分离生物大分子75

【知识目标】75

【技能目标】75

【**知识】75

一、膜的分类及性能76

二、膜分离过程的类型77

三、膜组件77

四、浓差极化与消除措施79

【知识拓展】膜污染的清除79

【实例训练】超滤法浓缩明胶蛋白水溶液80

【技能拓展】中空纤维式超滤膜组件的完整性检测82

任务十透析法除生物大分子中的无机盐83

【知识目标】83

【技能目标】83

【**知识】83

一、透析原理83

二、透析袋83

【知识拓展】膜的消毒与保存83

【实例训练】透析法去除蛋白质溶液中的无机盐84

目标检测85



项目五药物的高度纯化

任务十一离子交换色谱纯化药物87

【知识目标】87

【技能目标】87

【**知识】87

一、色谱87

二、离子交换色谱89

【知识拓展】吸附95

【实例训练】离子交换色谱分离混合氨基酸96

任务十二凝胶色谱纯化药物97

【知识目标】97

【技能目标】97

【**知识】97

一、色谱分离中凝胶的分类98

二、柱色谱凝胶的选择99

三、凝胶柱色谱的操作99

【知识拓展】疏水柱色谱100

【实例训练】凝胶柱色谱纯化蛋白质类药物101

【技能拓展】薄层色谱102

任务十三亲和色谱纯化药物103

【知识目标】103

【技能目标】103

【**知识】103

一、亲和色谱的基本原理104

二、亲和吸附剂 104

三、亲和色谱的操作107

四、亲和色谱的应用108

【知识拓展】110

一、气相色谱110

二、高效液相色谱111

【实例训练】亲和色谱纯化胰蛋白酶112

【技能拓展】纸色谱114

任务十四电泳法纯化药物115

【知识目标】115

【技能目标】115

【**知识】115

一、电泳的凝胶介质115

二、电泳分离的检测方法116

三、电泳系统的构成117

四、电泳分析常用方法120

【知识拓展】双向电泳121

【实例训练】蛋白质的醋酸纤维素薄膜电泳121

目标检测122



项目六药物的干燥

任务十五药物的干燥124

【知识目标】124

【技能目标】124

【**知识】124

一、真空干燥法124

二、喷雾干燥法126

三、冷冻干燥法128

【知识拓展】130

一、远红外线干燥130

二、微波干燥131

【实例训练】人工牛黄的真空干燥132

目标检测133



项目七生化药物的提取分离

任务十六氨基酸类药物的提取分离134

【知识目标】134

【技能目标】134

【**知识】134

一、氨基酸类药物的分类134

二、氨基酸的理化性质136

三、氨基酸类药物的生产方法137

四、氨基酸类药物的分离方法139

【知识拓展】141

一、生物药物的类型141

二、《中国药典》收载的氨基酸类药物142

【实例训练】143

实训L-胱氨酸的提取分离143

实训L-亮氨酸的提取分离145

目标检测146

任务十七多肽和蛋白质类药物的提取分离147

【知识目标】147

【技能目标】147

【**知识】147

一、多肽类药物148

二、蛋白质类药物148

三、多肽和蛋白质类药物的主要生产方法149

【实例训练】152

实训胰岛素的提取分离152

实训谷胱甘肽的提取分离155

实训胸腺肽的提取分离156

目标检测157

任务十八核酸类药物的提取分离158

【知识目标】158

【技能目标】158

【**知识】158

一、核酸类药物的分类159

二、核酸类药物分离纯化的要求159

三、核酸类药物的生产方法160

四、核酸类药物的分离方法161

五、重要核酸类药物的制备162

【实例训练】163

实训DNA的提取分离163

实训ATP的提取分离164

目标检测166

任务十九酶类药物的提取分离167

【知识目标】167

【技能目标】167

【**知识】167

一、酶类药物的性质及特性167

二、酶类药物的分类168

三、药用酶原料来源及选择169

四、酶类药物的提取和纯化170

【实例训练】174

实训溶菌酶的提取分离174

实训凝血酶的提取分离176

目标检测177

任务二十糖类药物的提取分离179

【知识目标】179

【技能目标】179

【**知识】179

一、糖类药物的分类179

二、多糖的药理作用180

三、糖类药物的性质181

四、糖类药物的提取方法182

五、糖类药物的分离纯化方法182

【知识拓展】多糖含量测定与纯度检验方法184

【技能拓展】多糖常用提取方案与程序184

【实例训练】186

实训银耳多糖制备及鉴定186

实训硫酸软骨素的提取分离187

目标检测189

任务二十一脂类药物的提取分离190

【知识目标】191

【技能目标】191

【**知识】191

一、脂类药物的分类191

二、脂类的性质191

三、脂类药物的临床应用192

四、脂类药物的生产方法193

五、脂类药物的分离方法193

【实例训练】194

实训卵磷脂的提取分离194

实训猪去氧胆酸的提取分离195

目标检测196

任务二十二抗生素与维生素类药物的提取分离197

【知识目标】197

【技能目标】197

【**知识】197

一、抗生素类药物的提取分离197

二、维生素类药物的提取分离205

【实例训练】206

实训青霉素的提取分离206

实训维生素B2的提取分离209

目标检测210



附录

附录1项目学习指南参考格式212

附录2实例训练任务单参考格式214



参考文献